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            行業(yè)產(chǎn)品

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            國(guó)產(chǎn)液相色譜柱的正相柱及反相柱使用方法

            閱讀:3341        發(fā)布時(shí)間:2018/4/11
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               國(guó)產(chǎn)液相色譜柱的分離作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的,液相色譜柱的分類是依據(jù)填料類型而定。
              正相柱:多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無(wú)定型和球型兩種。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠。
              反相柱:主要是以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)的非極性填料。也有無(wú)定型和球型之分。
              正相色譜柱的使用方法:
              1.新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積,zui后換成流動(dòng)相;
              2.正相使用時(shí),不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物;
              3.任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。
              反相色譜柱的使用方法:
              1.先用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水沖柱子;
              2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉水溶液沖柱子,立即用水沖洗,再換成流動(dòng)相;
              3.配制流動(dòng)相時(shí),應(yīng)各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1;
              4.反相條件下使用時(shí),要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。的pH范圍在pH 3-7;
              5.如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動(dòng)相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。

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