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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>非常好的活體染料——細(xì)胞膜熒光探針尼羅紅
目前脂類染色使用zui廣泛的染料是蘇丹染料,zui常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等,這種脂肪染色方法,實(shí)際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色的過(guò)程,經(jīng)研究認(rèn)為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時(shí),對(duì)蘇丹染料著色效果很好,根據(jù)這一原理,適當(dāng)提高溫度(37℃-60℃)會(huì)對(duì)組織切片產(chǎn)生較好的染色效果。
蘇丹染料主要針對(duì)于組織切片的脂質(zhì)染色,同時(shí)靈敏度也較低,且存在操作過(guò)程中試劑揮發(fā)過(guò)多,易形成背景沉淀,無(wú)法兼容活細(xì)胞等局限。
鑒于脂質(zhì)化學(xué)染料有上述諸多弊端,今天給大家介紹一下尼羅紅這種比較實(shí)用的脂質(zhì)熒光染料。
尼羅紅(也被稱為尼羅藍(lán)惡嗪酮)是一種親脂性染料,它對(duì)環(huán)境非常敏感。尼羅紅在脂質(zhì)豐富的環(huán)境中具有強(qiáng)烈的熒光,在以水為介質(zhì)的環(huán)境中,其熒光強(qiáng)度非常弱。它是非常好的活體染料,通過(guò)熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)。尼羅紅將細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體染成紅色。它對(duì)細(xì)胞質(zhì)中的脂質(zhì)體具有更好的選擇性,在細(xì)胞中看見(jiàn)的是金黃色熒光(450-500 nm 激發(fā); >528 nm發(fā)射)而不是紅色熒光(515-560 nm激發(fā); >590 nm 發(fā)射)。這是一種很強(qiáng)的熒光,但是只有在疏水性環(huán)境中。
艾美捷 尼羅紅(cat#22190)染色結(jié)果賞析:
尼羅紅染色I(xiàn)AA處理的褐藻(黃色是葉綠體,紅色是脂滴)
引文:Indole-3-acetic-acid-induced phenotypic plasticity in Desmodesmus algae by Chung et al., Scientific Reports, July 2018.
除了廣泛使用的尼羅紅,升級(jí)版脂質(zhì)染色工具: Nile Green和Droplite Red 跟尼羅紅性質(zhì)類似,它們也是在富含脂質(zhì)的環(huán)境中具有強(qiáng)烈熒光的,而在水性介質(zhì)中具有zui小的熒光??捎脽晒怙@微鏡,流式細(xì)胞術(shù)或熒光微孔板閱讀器檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂液滴,是一類優(yōu)異的活細(xì)胞脂質(zhì)染料。 其中Nile Green僅染色細(xì)胞內(nèi)脂液滴,具有綠色熒光,它可以與其他熒光染料一起使用,用于多重染色,彌補(bǔ)了尼羅紅染色的缺陷。
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