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D-二聚體是由纖維蛋白的兩個(gè)D片段通過交聯(lián)連接而成的蛋白質(zhì)。D-二聚體是幾種纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)中的一種,通過纖維蛋白溶解使血凝塊降解而形成。它用于診斷血液疾病彌散性血管內(nèi)凝血和血栓形成。Abbexa 艾美捷 小鼠D-二聚體ELISA試劑盒用于定量測定小鼠血漿中的纖維蛋白原D-二聚體蛋白。
Abbexa為生命科學(xué)、藥物開發(fā)和生物技術(shù)領(lǐng)域的科學(xué)家和研究者提供相關(guān)研究工具,涵蓋一抗、二抗、蛋白質(zhì)、ELISA試劑盒、酶以及其他用于研究的試劑盒和工具。
Abbexa 艾美捷 小鼠D-二聚體ELISA試劑盒化驗(yàn)原理:
該試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。將抗體預(yù)涂于96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣品和生物素結(jié)合試劑添加到孔中并孵育。生物素標(biāo)記的D-二聚體和預(yù)包被抗體上未標(biāo)記的D-二聚體之間發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)。然后加入HRP結(jié)合試劑,并孵育整個(gè)培養(yǎng)皿。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。在添加TMB基質(zhì)后,只有含有足夠D-二聚體的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在添加酸性停止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上D-二聚體的結(jié)合量成反比。在微孔板讀取器中,在450 nm處用分光光度法測量OD,由此可計(jì)算D-二聚體的濃度。
Abbexa 艾美捷小鼠D-二聚體ELISA試劑盒穩(wěn)定性:
由活性損失率決定。在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,保質(zhì)期內(nèi)的損失率小于5%。應(yīng)嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)室操作程序和性能波動(dòng)。另外,強(qiáng)烈建議整個(gè)分析過程由同一用戶執(zhí)行。
試劑盒組成部分:
預(yù)涂96孔微孔板
標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液
洗滌緩沖液
檢測試劑A
檢測試劑B
稀釋液A
稀釋劑B
底物溶液
封板機(jī)
試劑準(zhǔn)備:
1) 標(biāo)準(zhǔn)溶液:用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液緩沖液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋液緩沖液,按照方案中的說明,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行連續(xù)稀釋。
2) 洗滌緩沖液:按照方案中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液。
3) 檢測試劑制備:計(jì)算所需工作溶液的總體積。分別用稀釋劑A和稀釋劑B以1:100稀釋檢測試劑A和檢測試劑B。
結(jié)果計(jì)算:
該分析具有競爭性,因此樣品中的D-二聚體濃度與測量的吸光度呈負(fù)相關(guān)。用標(biāo)準(zhǔn)濃度(y軸)和測量的平均吸光度(x軸)的對(duì)數(shù)創(chuàng)建一個(gè)圖表。通過標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)應(yīng)用較佳擬合趨勢線。樣品的D-二聚體濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值。
注:為了獲得準(zhǔn)確的結(jié)果,須將樣品濃度稀釋至試劑盒的中等濃度。
艾美捷科技是Abbexa的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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