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            艾美捷T7 RNA聚合酶:高度啟動子專一性

            時間:2022/11/10閱讀:290
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            T7 RNA聚合酶(T7 RNA Polymerase)是一種RNA聚合酶,分子量約99kDa。專門催化5'3'方向的RNA形成過程。

             

            T7RNA聚合酶具有高度啟動子專一性,且只會轉(zhuǎn)錄T7噬菌體中位于T7啟動子下游的的DNADNA復(fù)制品。

             

            此酶在合成RNA的過程中,需要DNA模板與鎂離子(Mg2+)作為輔因子。牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)及精胺(spermidine)對此酶具促進效果。與細(xì)菌的RNA聚合酶的差異之一,在于T7RNA聚合酶不受抗生素立泛霉素(rifampicin)抑制。

             

            艾美捷T7 RNA聚合酶是一種DNA依賴性RNA多聚酶(99kDa),對含有T7噬菌體啟動子的DNA序列的體外RNA合成進行催化。高濃縮版T7 RNA聚合酶HC非常適合建立和優(yōu)化高產(chǎn)量的體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。所提供的T7 IVT設(shè)置緩沖液、MgCl2DTT溶液能夠測試不同的反應(yīng)條件,例如核苷酸/MgCl2濃度。

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            艾美捷T7 RNA聚合酶化學(xué)性質(zhì):

            僅供體外使用!

            運輸:凝膠包裝運輸

            儲存條件:-20°C儲存

            避免凍融循環(huán)

            保質(zhì)期:12個月

            純度:≥ 95%SDS-PAGE

            形式:液體

            濃度:2.02.2μg/μlT7 RNA聚合酶HC儲存緩沖液中的A280,?=140 l mmol-1 cm-1[1]

            J小優(yōu)化的分析設(shè)置建議:HighYield T7 RNA合成試劑盒(#RNT-101)。

            活性:1μl T7 RNA聚合酶HC37°下10分鐘內(nèi)產(chǎn)生>/=30μg RNA。這相當(dāng)于1000 U NEBT7 RNA聚合酶(高濃度),#M0460T(活性測定條件:1x T7 IVT建立緩沖液,補充10 mM DTT、12 mM MgCl23 mM NTPs、1μl T7 RNA聚合酶HC1μg DNA模板(1.4 kpb RNA轉(zhuǎn)錄物),20μl。用熒光微板測定法測定RNA產(chǎn)量。)

             

            艾美捷T7 RNA聚合酶組分

            T7 RNA Polymerase HC

            1x 50 μl (2 μg/μl)

            50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.1 % Triton-X-100, 50 % Glycerol (v/v), pH 8.0

            T7 IVT Set-up Buffer

            1x 200 μl (10x)

            400 mM Tris-HCl (pH 8.0), 20 mM Spermidin

            DTT

            1x 100 μl (100 mM)

            MgCl2

            1x 200 μl (200 mM)

            其它研究:

            RNT-101,高產(chǎn)T7 RNA合成試劑盒


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