質(zhì)膜H+ATP酶是約100kDa的蛋白質(zhì)家族，據(jù)信其不包括植物和真菌的質(zhì)膜。該蛋白質(zhì)錨定在生物膜內(nèi)，其產(chǎn)生用作能源的電化學(xué)梯度，并且對于攝取大多數(shù)代謝物和植物對環(huán)境的響應(yīng)（例如葉子的移動(dòng)）是必需的。

艾美捷質(zhì)膜H+ATP酶基本參數(shù)：

中文名稱：H + ATPase |等離子膜H + ATPase（兔抗體）

英文名字：H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase (rabbit antibody)

規(guī)格：50ul

應(yīng)用類型：Immunofluorescence (IF), Immunolocalization (IL), Western blot (WB)

來源宿主：兔

免疫原：KLH標(biāo)記合成肽，衍生自可用的di和單子葉植物，蕨類植物，苔蘚和藻類質(zhì)膜ATPase格式：凍干

保存建議：在-20°C下儲(chǔ)存凍干/重構(gòu)；一旦重構(gòu)，制作等分試樣以避免反復(fù)的凍融循環(huán)。請記住，在打開管子之前先旋轉(zhuǎn)管子，以避免粘附在管子蓋子或側(cè)面的材料可能造成的任何損失。不要將此抗體儲(chǔ)存在4°C。

推薦稀釋度：1:600-1:1000（IF），1:100（IL），1:1000-1:10000（WB）

艾美捷質(zhì)膜H+ATP酶應(yīng)用實(shí)例：

圖2：質(zhì)膜H+ATP酶在擬南芥根中的定位。擬南芥，延伸區(qū)，H+ATP酶（綠色）。將擬南芥根在多聚甲醛中固定30分鐘。組織在免疫定位之前進(jìn)行清潔。抗兔H+ATPase |質(zhì)膜一抗稀釋于1:300和與Alexa 555偶聯(lián)的抗兔IgG二抗。與DAPI可視化核共染色（藍(lán)色）。比例尺–100μm。圖1：來自擬南芥（1），大麥（2），玉米（3），煙草質(zhì)膜部分的20μg總蛋白，2.5μg（4） ，用蛋白質(zhì)提取緩沖液，PEB（AS08 300，用3至5體積的均質(zhì)緩沖液），在70°C下變性10分鐘，并在4-12%NuPage（Invitrogen）LDS-PAGE上分離，并印跡1h至PVDF。在20mm Tris，137mm氯化鈉ph7.6,0.1%（v/v）的封閉試劑中轉(zhuǎn)移后立即封閉斑點(diǎn)Tween-20（TBS-T）在室溫下攪拌1小時(shí)。Blots在一級抗體中以1:5000的稀釋度在室溫下孵育1h溫度攪拌。傾析出抗體溶液并將印跡短暫沖洗兩次，然后洗滌一次15分鐘和3次在室溫下在TBS-T中攪拌5分鐘。用二級抗體（抗兔IgG辣根過氧化物酶）孵育小鼠偶聯(lián)的推薦二抗AS09 602）在2%封閉溶液中于室溫?cái)嚢柘♂屩?span style="font-family: Calibri;">1:20 000，持續(xù)1h。如上洗滌印跡，并根據(jù)制造商的說明用化學(xué)發(fā)光檢測試劑顯色5分鐘。使用CCD成像儀（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One軟件（Bio-Rad）獲得印跡的圖像。曝光時(shí)間為2分鐘。

艾美捷質(zhì)膜H+ATP酶文獻(xiàn)參考：

Michalopoulou et al. (2022) The host exocyst complex is targeted by a conserved bacterial type-III effector that promotes virulence. Plant Cell. 2022 May 30:koac162. doi: 10.1093/plcell/koac162. Epub ahead of print. PMID:35640532.

Hofmann, Wienkoop & Luthje (2022) Hypoxia-Induced Aquaporins and Regulation of Redox Homeostasis by a Trans-Plasma Membrane Electron Transport System in Maize Roots. Antioxidants (Basel). 2022 Apr 25;11(5):836. doi:10.3390/antiox11050836. PMID: 35624700; PMCID: PMC9137787.

Huang et al (2021). Parasitic modulation of host development by ubiquitin-independent protein degradation. Cell. 2021 Sep 30;184(20):5201-5214.e12. doi: 10.1016/j.cell.2021.08.029. Epub 2021 Sep 17. PMID: 34536345; PMCID: PMC8525514.

Lapshin et al. (2021) Sterol Extraction from Isolated Plant Plasma Membrane Vesicles Affects H+-ATPase Activity and H+-Transport. Biomolecules. 2021 Dec 16;11(12):1891. doi: 10.3390/biom11121891. PMID: 34944535; PMCID: PMC8699270.

Choi et al. (2021) Augmented CO2 tolerance by expressing a single H+-pump enables microalgal valorization of industrial flue gas. Nat Commun. 2021 Oct 18;12(1):6049. doi: 10.1038/s41467-021-26325-5. PMID: 34663809; PMCID: PMC8523702.