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常規(guī)檢測核酸濃度的方法是吸光度法,即檢測核酸在260nm ( A260 )處的光吸收,吸光度法的弊端是樣本中的單鏈核苷酸和單體核苷酸會(huì)產(chǎn)生干擾信號(hào),樣品中的雜質(zhì)也會(huì)影響結(jié)果。吸光法無法區(qū)分DNA和RNA, 靈敏度也相對較低(用1cm的比色杯在A260值為0.1時(shí)相對應(yīng)的雙鏈DNA濃度為5ug/ml )。
Pico488是一種極為靈敏的熒光核酸染料,常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構(gòu)建,DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測等領(lǐng)域中具有重要意義,疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關(guān)系到人類的健康。
艾美捷B1102 Pico488-dsDNA定量試劑盒特點(diǎn):
相比傳統(tǒng)的方法,如紫外吸光法(A260)、探針雜交法、Hoechst 33258染料法等,Pico488 dsDNA 定量具有以下優(yōu)勢:
①靈敏度高:數(shù)量級較UV吸光讀數(shù)更敏感,檢測范圍為:1pg/ul–5ng/ul,可節(jié)省寶貴的樣品;
②特異性強(qiáng):在等摩爾的RNA存在的條件下,對dsDNA具有特異性;
③耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、lv仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA;
④易于使用:只需在樣品中加入染料,等待5分鐘,然后讀數(shù)即可,且適用于24和96孔板;與市面上的大多數(shù)熒光酶標(biāo)儀和熒光計(jì)兼容;
⑤適用范圍廣:可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。
B1102 Pico488-dsDNA定量試劑盒應(yīng)用:測定微量的DNA殘留(如疫苗生產(chǎn));對DNA樣品進(jìn)行精確定量。
Pico488-dsDNA定量試劑盒引用文獻(xiàn)賞析;
1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi: 10.1371/journal.pone.0223525
2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi: 10.18632/aging.101643
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