艾美捷CompTech人補(bǔ)體C1s酶：

名稱(chēng)： C1s前酶

編號(hào)： A103

規(guī)格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實(shí)際濃度見(jiàn)分析證書(shū))

類(lèi)型 冷凍液體

活動(dòng)： >80%c1在激活后與過(guò)量的C1-INH1：1結(jié)合。

純度： >90 %由SDS頁(yè)面

緩沖區(qū)： 50 mM磷酸鈉，130 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數(shù)。 A28 0 nm = 0 . 9 6 在 1 . 0 mg/mL

分子量： 86000Da (1鏈)

防腐劑： 無(wú)，0.22µm過(guò)濾。

存儲(chǔ)： - 7 0oC或以下。避免凍融。

根源 正常的人類(lèi)血清 (經(jīng)認(rèn)證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測(cè)均為陰性) 。

預(yù)防措施 在處理人類(lèi)血液制品時(shí)要采取常規(guī)的預(yù)防措施。

原點(diǎn) 在美國(guó)制造。

一般說(shuō)明

C1s原酶是一個(gè)單鏈86,000道爾頓蛋白，是C1s酶的天然形式。c1是c1復(fù)合物的 一個(gè)亞基，它是級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的第一個(gè)補(bǔ)體成分，被稱(chēng)為經(jīng)典的補(bǔ)體途徑。在c1被激活 之前，c1原酶是一種不活躍的酶原。C1復(fù)合物與抗原-抗體復(fù)合物 (免疫復(fù)合物) 結(jié) 合并被激活，產(chǎn)生C1r酶。C1復(fù)合物中的C1r酶激活C1原酶生成C1原酶。C1復(fù)合物是由 一個(gè)C1q、兩個(gè)C1r和兩個(gè)c1分子組成的非共價(jià)鈣依賴(lài)復(fù)合物。C1q通過(guò)其六個(gè)臂中的 兩個(gè)或更多個(gè)與IgG或IgM的Fc結(jié)構(gòu)域結(jié)合。多個(gè)臂與免疫復(fù)合物的結(jié)合導(dǎo)致復(fù)合物中 的兩個(gè)C1r蛋白 (蛋白酶酶原) 激活產(chǎn)生兩個(gè)蛋白酶，切割并激活復(fù)合物中的兩個(gè)C1s 原酶(Morikis，D。和蘭布里斯，J。D. (2005)).這種c1原酶的激活是由含有58000和 28000道爾頓片段的兩鏈c1酶的分裂引起的。

活化的C1s酶可裂解補(bǔ)體組分C4，釋放C4a，并啟動(dòng)C4b與活化表面的共價(jià) 連接。激活的C1s也能切割C2，C2的較大片段與表面附著的C4b結(jié)合，形成C4b， C2a，經(jīng)典途徑的C3/C5轉(zhuǎn)化酶。

物理特性和結(jié)構(gòu)

C1s原酶是一種高分子量 (86000道爾頓) ，單鏈，類(lèi)胰蛋白酶的酶原。c1以 31 ug/mL存在于血漿中。C1s原酶被C1r酶激活(Dodds，A。W.和Sim，R。B.編輯 ( 19 97) )。兩個(gè)C1r分子在鈣的存在下形成一個(gè)C1r-C1r復(fù)合物。C1r-C1r在鈣存在的情 況下與兩個(gè)c1分子形成穩(wěn)定的復(fù)合物。這種四聚體可以存在于溶液中，但在C1q存在 的情況下，它結(jié)合形成C1復(fù)合物，在鈣離子存在的情況下是穩(wěn)定的。C1s原酶在血液 中循環(huán)在這個(gè)76.6萬(wàn)道爾頓C1綜合體中。當(dāng)C1r處于C1復(fù)合物中時(shí)，C1r的自我激活，以 及隨后的C1r與C1酯酶抑制劑 (C1-INH) 的弱關(guān)聯(lián)控制，純化的C1r也發(fā)生類(lèi)似的 穩(wěn)定。然而，C1s和C1r酶通過(guò)與C1-INH結(jié)合(Ziccardi，R.J.。 (1982)).

功能

C1s原酶可以在鈣存在的情況下與C1q和C1r原酶形成C1復(fù)合物。C1s原酶沒(méi)有 蛋白水解活性，必須與C1r酶孵育轉(zhuǎn)化為C1s酶才能具有活性。C1s酶可以用來(lái)激活流 體相中的c4或c2。在Mg++存在的情況下，活化的C4b和C2a可以形成流體相C4b，C2a， 這是經(jīng)典途徑的C3/C5轉(zhuǎn)化酶。由C1原酶組成的C1復(fù)合物，在激活C1原酶后，會(huì)激活 C4和C2。這發(fā)生在C1與攜帶抗體的細(xì)胞結(jié)合后，如EA (Dodds，A。W.和Sim，R。B.編 輯 (1997) ；摩根，B。P.ed. (2000)).EA是一種綿羊紅細(xì)胞，其兔IgM抗綿羊紅細(xì)胞 抗體與其表面結(jié)合 (CompTech #B200) (Morgan，B。P.ed. (2000)).

測(cè)定

通過(guò)首先用C1r酶激活C1原酶，然后測(cè)量其與蛋白酶抑制劑C1抑制劑 (C1INH ，CompTech #A140) 的結(jié)合能力，來(lái)檢查C1原酶的活性。它也可以用于形成由一個(gè) C1q、兩個(gè)C1r和兩個(gè)C1分子組成的C1復(fù)合物，這可以檢測(cè)C1復(fù)合物 (CompTech    #A098) 。

參考文獻(xiàn)

Dodds, A.W. and Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN

019963539) Oxford University Press, Oxford.

Morikis, D. and Lambris, J.D. editors. (2005) Structural Biology of the Complement

System. (ISBN 0-8247-2540-9) Taylor & Francis Group, Florida.

Morgan, B.P. ed. (2000) Complement Methods and Protocols. (ISBN 0-89603-654-5)

Humana Press, Inc., Totowa, New Jersey.