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            初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            艾美捷Melanopsin-SAP特異性制備及相關(guān)用途介紹

            時(shí)間:2023/7/6閱讀:131
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            Melanopsin在非洲爪蛙的黑素細(xì)胞(光敏皮膚細(xì)胞)中被發(fā)現(xiàn)是一種新型視蛋白。然后發(fā)現(xiàn)Melanopsin也存在于小鼠視網(wǎng)膜中,特別是在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中,并且它介導(dǎo)非視覺(jué)光感受任務(wù)。Melanopsin也由Opn4編碼,在各種生物體中具有直系同源物。Melanopsin-SAP特異性地消除表達(dá)Melanopsin的固有光敏視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(ipRGC)。ipRGC具有驚人的長(zhǎng)過(guò)程,參與明暗感知,是晝夜節(jié)律的決定因素。

             

            Melanopsin-SAP是親和純化的兔多克隆抗體對(duì)小鼠Melanopsin和核糖體滅活蛋白saporin的化學(xué)偶聯(lián)物。它特異性地消除表達(dá)Melanopsin的固有光敏視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(ipRGC)。

             

            Melanopsin-SAP [IT-44, KIT-44]:一種用于消除小鼠固有光敏視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中表達(dá)黑視蛋白的細(xì)胞的工具;通過(guò)親和純化的兔多克隆抗體靶向小鼠黑視蛋白,通過(guò)皂苷消除。

             

            特異性和制備:

            這種靶向毒素識(shí)別小鼠固有光敏視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)表達(dá)黑色素的細(xì)胞(ipRGCs)。黑色素蛋白SAP是一種親和純化兔的化學(xué)偶聯(lián)物抗小鼠黑素的多克隆抗體(Cat.#AB-N39)和核糖體失活蛋白saporinCat。#PR-01)。

             

            用途:

            黑色素素SAP特異性清除本質(zhì)光敏視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(ipRGCs)表達(dá)黑色素蛋白酶。Melanopsin-SAP的使用和效果在G?z等人。

            材料的批量變化;工作稀釋度必須由最終用戶(hù)確定。如果這是一個(gè)新的地段,在開(kāi)始一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)方案之前,你必須評(píng)估正確的工作稀釋度

             

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            saporin/抗黑素(UF008)綴合物(目錄#IT-44)以劑量依賴(lài)的方式破壞培養(yǎng)的RGC-5細(xì)胞。穩(wěn)定表達(dá)或不表達(dá)RGC-5細(xì)胞的培養(yǎng)物小鼠黑色素蛋白酶暴露于黑色素蛋白SAP 4天。偶聯(lián)物的濃度顯示在每列的上方實(shí)驗(yàn)一式三份。每個(gè)面板代表從單個(gè)井中隨機(jī)選擇的場(chǎng)。

             

            儲(chǔ)存:

            使用前,在微型冰箱中輕輕旋轉(zhuǎn)材料5-10秒。將材料儲(chǔ)存在未稀釋的環(huán)境中在–20°C下進(jìn)行1-2個(gè)月的等分試樣。為了長(zhǎng)期儲(chǔ)存,將材料儲(chǔ)存在–80°C的溫度下。材料應(yīng)為等分到方便的體積和數(shù)量,以避免重復(fù)冷凍和解凍,從而損壞蛋白質(zhì)含量。在這些條件下,該材料具有非常穩(wěn)定的保質(zhì)期。解凍應(yīng)在室溫或在冰上。解凍后的溶液在使用前應(yīng)保持在冰上。不要將還原劑(如二硫代蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸)與此材料一起使用。它會(huì)使毒素失活。這種物質(zhì)是一種極其強(qiáng)效的細(xì)胞毒素。應(yīng)由經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行處理。手套和搬運(yùn)本產(chǎn)品時(shí)需要佩戴安全眼鏡。處置時(shí)必須小心;高壓滅菌或暴露至0.2M的氫氧化鈉將使材料失活。所有與此材料接觸的實(shí)驗(yàn)室用品應(yīng)該是一樣的。

             

            參考文獻(xiàn):

            1. G?z D, Studholme K, Lappi DA, Rollag MD, Provencio I, Morin LP (2008) Targeted

            destruction of photosensitive retinal ganglion cells with a saporin conjugate alters the effects of

            light on mouse circadian rhythms. PLoS ONE 3(9):e3153.


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