二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的顯色底物，DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物，免疫印記可直接在膜上顯示條帶；免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫5-20分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯色情況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固，其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察，也可經(jīng)OsO4處理后，增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度，用于電鏡觀察。

艾美捷 Biogradetech DAB顯色試劑盒：

中文名稱：DAB顯色試劑盒

英文名字：DAB Substrate Kit (DAB staining)

Biogradetech貨號(hào)：B-IMWRS51-100T

規(guī)格：100T

保存建議：DAB顯色試劑盒儲(chǔ)存條件：2-8°C避光

本試劑盒可以用于細(xì)胞或組織在免疫組化或原位雜交時(shí)結(jié)合的辣根過氧化物酶顯色，也可以用于 Western 等結(jié)合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測。同時(shí)也可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)源性的辣根過氧化物酶顯色。

DAB顯色試劑盒使用參考：

1. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品或膜，在與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當(dāng)洗滌 液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。對(duì)于檢測內(nèi)源性辣根過氧化物酶的組織或細(xì)胞樣品，在適當(dāng)固定后，也用適 當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。

2. 按照1:1的比例將顯色液A、B液混勻，混勻后即配制成DAB染色工作液。

3. 后一次洗滌完畢后，去除洗滌液，加入適量DAB染色工作液，確保能充分覆蓋樣品。

4. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長時(shí)間(可長達(dá)24小時(shí))，直至顯色至預(yù)期深淺。

5. 去除DAB染色工作液，用蒸餾水洗滌1-2次即可終止顯色反應(yīng)。

6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品，顯色反應(yīng)終止后，如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色，以便于觀察。對(duì)于膜，顯色反應(yīng)終止后，可以室溫晾干避光保存。

注意事項(xiàng)：

DAB 對(duì)人體有害，請注意適當(dāng)防護(hù)。 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。