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            鏈霉親和素磁珠(Streptavidin,SA-磁珠)實(shí)驗(yàn)步驟說明

            時(shí)間:2024/1/2閱讀:886
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            Streptavidin磁珠,也被稱為SA磁珠,是直徑為2.8 µm的超順磁性顆粒,與高純度的鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)。這些磁珠可用于捕獲標(biāo)記有生物素的底物,包括抗原、抗體和核酸。Streptavidin磁珠可用于捕獲標(biāo)記有生物素的底物,包括抗原、抗體和核酸。

             

            艾美捷鏈霉親和素磁珠(Streptavidin,SA-磁珠)-2.8 um

            貨號(hào):C-BETA2002

            規(guī)格:2 mL / 10 mL / 100 mL

            儲(chǔ)存條件:2°C8°C

             

            鏈霉親和素磁珠(Streptavidin,SA-磁珠)組成:

            51.png

             

            鏈霉親和素磁珠(Streptavidin,SA-磁珠)實(shí)驗(yàn)步驟:

            1. 捕獲生物素化核酸

            1.1 為了確保均勻性,在使用前輕輕渦旋混合珠子20秒。將100µL Streptavidin磁珠加入1.5 mL微離心管中。將管子放入磁架中以收集珠子,去除并丟棄上清液。注意:建議使用生物素化分子與磁珠之間的比例為1:12:1,以達(dá)到珠子結(jié)合的飽和度。生物素化分子的量需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。

            1.2 向管子中加入1 mL洗滌緩沖液A。反復(fù)倒置管子或輕輕渦旋混合。使用磁架收集珠子,然后去除并丟棄上清液,重復(fù)此步驟兩次。注意:當(dāng)使用大于1 mL磁珠體積時(shí),建議向珠子中加入相等體積的洗滌緩沖液A。

            1.3 加入500µL稀釋于洗滌緩沖液A中的生物素化核酸(以達(dá)到2mg/mL的珠子濃度),通過搖動(dòng)充分混合,并在室溫下震蕩30分鐘或在4°C下孵育2小時(shí)。

            1.4 使用磁架收集珠子,并將上清液轉(zhuǎn)移到新管中。

            1.5 重復(fù)步驟1.2"兩次以洗滌磁珠。

            1.6 根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求,加入適當(dāng)?shù)牡望}緩沖液以重新懸浮磁珠。生物素化核酸的捕獲步驟現(xiàn)已完成。磁珠可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。

            2. 捕獲生物素化抗體/蛋白質(zhì)

            2.1 為了確保均勻性,在使用前輕輕渦旋混合珠子20秒。將100 µL Streptavidin磁珠加入1.5 mL微離心管中。將管子放入磁架中以收集珠子,去除并丟棄上清液。注意:建議使用生物素化分子與磁珠之間的比例為1:12:1,以達(dá)到珠子結(jié)合的飽和度。生物素化分子的量需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。

            2.2 向管子中加入1 mL洗滌緩沖液B。反復(fù)倒置管子或輕輕渦旋混合。使用磁架收集珠子,然后去除并丟棄上清液,重復(fù)此步驟三次。注意:當(dāng)使用大于1 mL磁珠體積時(shí),建議向珠子中加入相等體積的洗滌緩沖液B。

            2.3 加入500 µL稀釋于洗滌緩沖液B中的生物素化抗體/蛋白質(zhì)(以達(dá)到1mg/mL的珠子濃度),通過搖動(dòng)充分混合,并在室溫下震蕩1小時(shí)。

            2.4 使用磁架收集珠子,并將上清液轉(zhuǎn)移到新管中。

            2.5 重復(fù)“步驟2.2"五次以洗滌磁珠。

            2.6 根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求,加入適當(dāng)?shù)牡望}緩沖液以重新懸浮磁珠。生物素化抗體/蛋白質(zhì)的捕獲步驟現(xiàn)已完成。磁珠可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。


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