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單胺氧化酶(MAO,EC1.4.3.4)主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官中,尤其是分泌腺、腦和肝臟。它還存在于無脊椎動(dòng)物和豆科植物等植物中。盡管MAO在體內(nèi)的含量較低,但它具有重要的生理功能,其活性可以反映肝纖維化程度。此外,MAO活性異常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)紊亂,引發(fā)多種疾病。EZMeta™單胺氧化酶(MAO)比色活性試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單的方法,用于檢測(cè)血清、血漿、動(dòng)物和植物組織、細(xì)胞、細(xì)菌等多種生物樣品中的MAO活性。在該試劑盒中,MAO催化單胺底物的脫胺反應(yīng),生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化為酸。底物在360 nm處具有特征吸收峰。360 nm處單胺底物濃度的降低速率可以反映MAO的活性。
艾美捷Biogradetech單胺氧化酶 (MAO) 活性檢測(cè)試劑盒:
貨號(hào):D-AKC1900
規(guī)格:48T / 96T
儲(chǔ)存條件:存放于4°C,避光,保存12個(gè)月
適用樣本:血清、血漿、動(dòng)物和植物組織、細(xì)胞、細(xì)菌
提供的材料和儲(chǔ)存條件:
試劑制備:
提取緩沖液Ⅰ:按照提供的狀態(tài)直接使用。使用前使其恢復(fù)至室溫。儲(chǔ)存于4°C。
提取緩沖液Ⅱ:按照提供的狀態(tài)直接使用。使用前使其恢復(fù)至室溫。儲(chǔ)存于4°C。
測(cè)定緩沖液:按照提供的狀態(tài)直接使用。使用前使其恢復(fù)至室溫。儲(chǔ)存于4°C。
底物:按照提供的狀態(tài)直接使用。使用前使其恢復(fù)至室溫。儲(chǔ)存于4°C,避光。
樣本制備:
注意:建議使用新鮮樣本。如果不能立即進(jìn)行測(cè)定,樣本可在-80°C下保存一個(gè)月。
1. 動(dòng)物和植物組織:稱取0.1克組織,加入1 mL提取緩沖液Ⅰ并均質(zhì)。在4°C下以1,000 g離心10分鐘,廢棄沉淀。將上清液轉(zhuǎn)移到另一個(gè)預(yù)冷的離心管中,在4°C下以10,000 g離心30分鐘,廢棄上清液。向沉淀中加入1 mL預(yù)冷的提取緩沖液Ⅱ,搖勻,然后在4°C下以16,000 g離心40分鐘,廢棄上清液。加入1 mL預(yù)冷的測(cè)定緩沖液,搖勻。置于冰上進(jìn)行測(cè)試。
2. 細(xì)胞或細(xì)菌:收集5 x 10^6個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌放入離心管中,用冷PBS洗滌細(xì)胞或細(xì)菌,離心后廢棄上清液;加入1 mL提取緩沖液Ⅰ超聲破碎細(xì)胞或細(xì)菌5分鐘(功率20%或200 W,超聲3秒,間隔7秒,重復(fù)30次)。在4°C下以1,000 g離心10分鐘,廢棄沉淀。將上清液轉(zhuǎn)移到另一個(gè)預(yù)冷的離心管中,在4°C下以10,000 g離心30分鐘,廢棄上清液。向沉淀中加入1 mL預(yù)冷的提取緩沖液Ⅱ,搖勻,然后在4°C下以16,000 g離心40分鐘,廢棄上清液。加入1 mL預(yù)冷的測(cè)定緩沖液,搖勻。置于冰上進(jìn)行測(cè)試。
3. 血清(血漿)樣本:直接進(jìn)行測(cè)試。
注意:如果通過蛋白濃度計(jì)算含量,建議使用EZMeta™單胺氧化酶(MAO)比色活性試劑盒對(duì)總蛋白進(jìn)行定量測(cè)定,效果更佳。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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