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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>游離膽固醇 (FC) 檢測試劑盒的樣品準(zhǔn)備方法
游離膽固醇(Free cholesterol,FC)是細(xì)胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸和維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。組織中的游離膽固醇濃度可作為衡量脂質(zhì)代謝的指標(biāo)。EZMeta™ 游離膽固醇(FC)比色法檢測試劑盒提供了一種簡便的方法,用于檢測動物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、血清和血漿等生物樣品中的游離膽固醇。其原理是膽固醇氧化酶催化游離膽固醇生成Δ4-膽甾酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基苯酚和酚生成紅色醌化合物,其吸收峰位于500 nm,顏色的深淺與游離膽固醇含量成正比。
艾美捷 游離膽固醇 (FC) 檢測試劑盒:
貨號:D-AKC2210
規(guī)格:48T / 96T
儲存條件:儲存在4°C下,避光,保存12個月
適用樣本:血清、血漿、動物組織、細(xì)胞、細(xì)菌
所需材料但不提供:
·能夠測量500 nm吸光度的微孔板讀數(shù)器或可見光分光光度計
·96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液頭
·冰制造機(jī)、冷藏離心機(jī)、水浴
·無水乙醇 ·勻漿機(jī)(用于組織樣本)
試劑制備:
FC工作溶液:按提供的狀態(tài)直接使用。使用前平衡至37°C。儲存在4°C。 標(biāo)準(zhǔn)品:按提供的狀態(tài)直接使用。使用前平衡至室溫。儲存在4°C,避光保存。 制定標(biāo)準(zhǔn)曲線:將2 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品用無水乙醇稀釋至表格中所示的1、0.5、0.25、0.125、0.063、0.031 µmoL/mL。
游離膽固醇 (FC) 檢測試劑盒樣品制備:
注意:建議使用新鮮樣品。如果不能立即測定,樣品可以在-80°C下保存一個月。 1. 動物組織:稱取約0.1 g組織,加入1 mL無水乙醇。在冰上勻漿。以8,000 g離心10分鐘,4°C。使用上清液進(jìn)行測定,并放置在冰上進(jìn)行測試。 2. 細(xì)胞或細(xì)菌:收集5×10^6個細(xì)胞或細(xì)菌到離心管中,在離心后棄去上清液;加入1 mL無水乙醇,在冰浴中超聲破碎細(xì)胞或細(xì)菌5分鐘(功率20%或200 W,超聲3秒,間隔7秒,重復(fù)30次)。以8,000 g離心10分鐘,4°C。使用上清液進(jìn)行測定,并放置在冰上進(jìn)行測試。 3. 血清(血漿)樣品:直接進(jìn)行測試。 注意:如果通過蛋白質(zhì)濃度計算含量,最好使用EZMeta™ 游離膽固醇(FC)比色法檢測試劑盒定量總蛋白質(zhì)。
游離膽固醇 (FC) 檢測試劑盒典型數(shù)據(jù):
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途
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