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永生化細胞(也稱為連續(xù)細胞或細胞系)是端粒和/或腫瘤抑制基因已經(jīng)被改變的原代細胞。腫瘤抑制基因(例如p53和Rb)對于在DNA損傷的可能性更高時(即在多個細胞周期后,更多關于細胞周期的信息請訪問我們的知識庫)向細胞發(fā)出停止分裂的信號非常重要。在永生化細胞的情況下,這些基因已經(jīng)被抑制或其功能被抑制,使細胞能夠無限期地繼續(xù)分裂。
圖:端粒是DNA的重復區(qū)域,形成染色體末端的保護“帽",保護染色體免受退化。經(jīng)過每一輪細胞周期,這些端粒會變短,Z終導致細胞進入衰老階段,細胞停止分裂。
理想的永生化細胞具有與其親本組織相似的基因型和表型。一些實驗室使用相同的永生化細胞數(shù)十年,因此,它們的細胞系已經(jīng)被很好地表征,并為其長期項目提供了一致的基線。Z古老和Z常用的人類細胞系是HeLa細胞系,該細胞系是在20世紀50年代從宮頸癌細胞中建立的!但是,檢查細胞系的身份以確保您的細胞系是您認為的那樣是非常重要的。
原代細胞優(yōu)缺點:
優(yōu)點:
1、與親本組織有相似的染色體數(shù)量
2、具有親本組織的專門生化特性(生長因子和激素分泌)
3、是體內(nèi)情況的Z佳實驗模型
缺點:
1、有限的壽命/有限的細胞分裂次數(shù)
2、種群之間和不同制備之間的相當大的變異
3、在培養(yǎng)中維持起來非常困難(非常“挑剔")——也更容易受到污染
4、難以獲得(供體可用性)
艾美捷永生化細胞優(yōu)缺點:
優(yōu)點:
1、傾向于比原代細胞更快地生長,并且可以生長到更高的細胞密度
2、細胞類型統(tǒng)一(大多數(shù)是克隆的)
3、相同的供體來源,因此批次間變化較小
4、大多數(shù)細胞特性從親代細胞中得以保留
5、為長期項目節(jié)省了金錢和時間
6、適用于體外實驗
缺點:
1、細胞在體外培養(yǎng)過程中可能隨時間分化
2、體外的細胞行為可能不代表體內(nèi)情況
3、表型或細胞功能可能發(fā)生改變
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