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            QA-Bio-DMB唾液酸標記試劑盒的特性和應用

            時間:2024/7/5閱讀:171
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            QA-Bio-DMB唾液酸標記試劑盒包含兩套標記試劑和一套唾液酸參考板:

            標準品:

            NeuAcNeuGc定量標準品

            唾液酸參考板

            釋放和標記試劑

             

            DMB染料(1,2-二氨基-4,5-亞甲二氧基苯.2HCl):

            醋酸

            醋酸中的巰基乙醇

            次亞硫酸鈉(還原劑)

            唾液酸對于治療性糖蛋白的穩(wěn)定性和三維構象非常重要。已經(jīng)證明它們影響糖蛋白在血清中的半衰期,并通過這些生物治療劑影響患者的抗炎和免疫反應?;谶@些原因,監(jiān)測這些治療性糖蛋白上發(fā)現(xiàn)的唾液酸的水平和類型至關重要。

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            艾美捷QA-Bio-DMB唾液酸標記試劑盒LT-KDMB提供了從糖蛋白中釋放唾液酸并用DMB進行標記所需的一切。試劑盒包含用于22個或96個糖蛋白樣品(每個樣品50-100微克糖蛋白)的試劑和材料。每次標記應該能夠處理每個樣品大約10皮摩爾到2.5納摩爾的唾液酸。

             

            QA-Bio-DMB唾液酸標記試劑盒中包括一個唾液酸參考板(包含Neu5AcNeu5Gc;Neu5,7Ac2Neu5,Gc9Ac;Neu5,9Ac2;Neu5,7,(8),9Ac3Gc)以及NeuAcNeuGc定量標準品。這三種標準品可以與釋放的唾液酸樣品一起用DMB進行標記。NeuAcNeuGc定量標準品的連續(xù)稀釋準備使定量分析成為可能。

             

            作為陽性對照,建議使用QA-Bio的胎蛋白糖蛋白,它包含NeuAcNeuGc唾液酸,和/或作為陽性對照的定量糖肽(BQ-GPEP-A2G2S2-10U)。水可以用作陰性對照。

             

            唾液酸的釋放 從糖蛋白中釋放唾液酸是通過溫和的酸水解進行的。樣品和對照在80°C下用2M醋酸孵育2小時。

             

            唾液酸標記反應 釋放的唾液酸用1,2-二氨基-4,5-亞甲二氧基苯-2HClDMB)進行熒光標記。酸水解樣品和過程對照加上Ludger唾液酸標準品:Neu5Ac、Neu5Gc、唾液酸參考板,如果使用的話還有Neu5,9Ac2,在50°C下用DMB孵育3小時。

             

            通過HPLCUHPLC分析 利用Neu5AcNeu5Gc標準品計算標準曲線。唾液酸參考板和Neu5,9Ac2用于唾液酸鑒定??梢允褂?span style="font-family: Calibri;">LudgerSep R1x150mm色譜柱進行HPLC分析,或使用LudgerSep uR2x100mm色譜柱通過UHPLC進行分析。

             

            QA-Bio-DMB唾液酸標記試劑盒文獻參考:

            Thomson RI, Gardner RA, Strohfeldt K, Fernandes DL, Stafford GP, Spencer DIR, Osborn HMI. Analysis of Three Epoetin Alpha Products by LC and LC-MS Indicates Differences in Glycosylation Critical Quality Attributes, Including Sialic Acid Content. Anal Chem. Jun 20;89(12):6455-6462.( 2017)

             

            艾美捷科技是QA-Bio的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品與服務。


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