Cayman的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）比色活性測定試劑盒提供了一種檢測血清、血漿、組織樣本和細(xì)胞裂解物中ALT活性的便捷方法。ALT活性的測量是通過監(jiān)測使用乳酸脫氫酶（LDH）的偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中NADH氧化的速率來進(jìn)行的。NADH氧化為NAD+的同時，340nm處的吸光度降低。在ALT活性是限速的情況下，速率下降與樣本中的ALT活性成正比。

需要但未提供：請下載試劑盒小冊子，以驗證此檢測是否需要超純水（Milli-Q或同等產(chǎn)品）或任何其他成分。

警告：本品不適用于人類或獸醫(yī)。

測定方案：

艾美捷Cayman的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性分析試劑盒（#700260-96），提供了一種方便的方法，用于檢測血清、血漿、組織樣本和細(xì)胞裂解液中的ALT活性。通過監(jiān)測乳酸脫氫酶（LDH）耦聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中NADH氧化的速率來測量ALT活性。NADH氧化成NAD*伴隨著在340納米處吸光度的降低。在ALT活性成為速率限制步驟的情況下，速率的降低與樣本中的ALT活性直接成比例。

執(zhí)行測定：

1. 陽性對照孔 - 在板中z定的孔中加入150μl的底物、20μl的輔因子和20μl的陽性對照。

2. 樣本孔 - 在板中z定的孔中加入150μl的底物、20μl的輔因子和20μl的樣本。

3. 覆蓋板并在37℃下孵化15分鐘。

4. 移除板蓋，并迅速通過向所有使用的孔中加入20μl的ALT啟動劑來啟動反應(yīng)。

5. 立即在37℃下每分鐘測量一次340納米處的吸光度，持續(xù)10分鐘。如果ALT活性較低，繼續(xù)讀取長達(dá)60分鐘。注意：背景孔（可選）- 在評估樣本中的ALT活性時，背景活性通常不重要。然而，如果需要，可以為每個樣本獲得背景值。對于每個正在測定的樣本，在板中z定的孔中加入150μl稀釋的測定緩沖液（不含ALT底物）、20μl的樣本、20μl的ALT輔因子和20μl的ALT啟動劑。立即在37℃下每分鐘測量一次340納米處的吸光度，持續(xù)10分鐘。如果ALT活性較低，繼續(xù)讀取長達(dá)60分鐘。

圖. 豬心丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性