聚蛋白聚糖酶-1（ADAMTS-4，也稱為軟骨素酶-1）是解整合素和金屬蛋白酶家族（ADAMTS）的重要成員，主要參與軟骨素的降解。軟骨素是軟骨的主要結(jié)構(gòu)成分，而ADAMTS-4在骨關(guān)節(jié)炎（OA）軟骨的退化過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。因此，檢測ADAMTS-4的活性對于研究骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制以及開發(fā)相關(guān)治療藥物具有重要意義。

SensoLyte 520聚蛋白聚糖酶-1活性檢測試劑盒是一種基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）原理的檢測試劑盒，專用于連續(xù)測量ADAMTS-4的酶活性。該試劑盒采用5-FAM作為熒光團，TAMRA作為猝滅劑的FRET肽底物。在完整的FRET肽中，5-FAM的熒光被TAMRA猝滅；當ADAMTS-4切割FRET肽時，5-FAM的熒光得以恢復(fù)，并可在激發(fā)/發(fā)射波長為490 nm/520 nm處連續(xù)監(jiān)測。熒光強度的增加與ADAMTS-4的活性呈正相關(guān)，且由于其較長的發(fā)射波長，該底物受測試化合物自身熒光的干擾較小。

艾美捷SensoLyte 520聚蛋白聚糖酶-1活性檢測試劑盒：

貨號：AS-72114

吸收波長（nm）：490

發(fā)射波長（nm）：520

儲存條件：所有組分均需在-20°C下保存。組分A和B需避光并防潮。組分C和E可在室溫下保存以便于使用。

應(yīng)用：

熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）

蛋白酶活性檢測

生物標志物靶點：ADAMTS-4（軟骨素酶）

檢測方法：熒光法

檢測下限：0.1 ng/ml

研究領(lǐng)域：細胞黏附與細胞外基質(zhì)

子研究領(lǐng)域：細胞黏附蛋白

用途：僅限研究使用

試劑盒組成：

組分A：5-FAM/5-TAMRA，軟骨素酶-1底物，激發(fā)/發(fā)射波長=490 nm/520 nm：60 µL

組分B：5-FAM，熒光參考標準品，激發(fā)/發(fā)射波長=490 nm/520 nm：1 mM，10 µL

組分C：檢測緩沖液：20 mL

組分D：對照抑制劑：100 µM，10 µL

組分E：終止液：10 mL

優(yōu)勢與特點

高靈敏度：熒光法檢測，靈敏度高，檢測下限低至0.1 ng/ml。

特異性高：基于FRET原理，特異性檢測ADAMTS-4活性，背景干擾低。

操作簡便：采用96孔板格式，適合高通量篩選。

穩(wěn)定性好：試劑盒組分在-20°C下保存，有效期長達2年。

實驗結(jié)果示例

在一項實驗中，使用該試劑盒檢測A549細胞裂解液中的Phospho-p38，結(jié)果顯示FRET底物被ADAMTS-4切割后，5-FAM熒光顯著增加，表明試劑盒能夠有效檢測ADAMTS-4的活性。

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