酶免疫測(cè)定法用于定量測(cè)定5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）尿蛋白。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品5-HIAA EIA, (96 孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

檢測(cè)原理：

5-HIAA的定量測(cè)定遵循競(jìng)爭(zhēng)性酶免疫測(cè)定的基本原理。首先，5-HIAA是通過(guò)甲基化衍生的。隨后的競(jìng)爭(zhēng)性ELISA使用微量滴定板格式?？乖c微量滴定板的固相結(jié)合。標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣品中的甲基化分析物與固相結(jié)合分析物競(jìng)爭(zhēng)固定數(shù)量的抗體結(jié)合位點(diǎn)。在系統(tǒng)達(dá)到平衡后，通過(guò)洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗體復(fù)合物。使用TMB作為底物，通過(guò)抗兔IgG-過(guò)氧化物酶偶聯(lián)物檢測(cè)與固相結(jié)合的抗體。在450nm處監(jiān)測(cè)反應(yīng)。未知樣品的定量是通過(guò)將其吸光度與用已知標(biāo)準(zhǔn)濃度制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

程序注意事項(xiàng)、指南和警告：

1. 此試劑盒僅供專業(yè)使用。用戶應(yīng)充分理解本協(xié)議，以成功使用此試劑盒。僅隨試劑盒提供的測(cè)試說(shuō)明有效，必須用于運(yùn)行檢測(cè)。只有嚴(yán)格和謹(jǐn)慎地遵循所提供的說(shuō)明，才能達(dá)到可靠的性能。

2. 必須遵循良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）的原則。

3. 為了減少接觸潛在有害物質(zhì)的風(fēng)險(xiǎn)，必要時(shí)請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性防護(hù)手套和防護(hù)眼鏡。

4. 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應(yīng)置于室溫下，并輕輕但c底地混合。避免試劑和樣本的反復(fù)凍融。

5. 用于稀釋或重組時(shí)，請(qǐng)使用去離子水、蒸餾水或超純水。

6. 微孔板包含易斷條。未使用的孔必須存放在2°C至8°C的密封鋁箔袋中，并與干燥劑一起存放，并在提供的框架內(nèi)使用。

7. 強(qiáng)烈推薦對(duì)樣本進(jìn)行雙重測(cè)定，以便識(shí)別可能的吸管誤差。

8. 一旦測(cè)試開始，所有步驟都應(yīng)連續(xù)完成。確保所需的試劑、材料和設(shè)備在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間準(zhǔn)備就緒。

9. 孵化時(shí)間會(huì)影響結(jié)果。所有孔應(yīng)以相同的順序和時(shí)間間隔處理。

10. 為了避免試劑的交叉污染，請(qǐng)使用新的一次性吸管尖分裝每種試劑、樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品。

11. 每次運(yùn)行都必須建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

12. 對(duì)照應(yīng)包含在每次運(yùn)行中，并落在既定的置信限內(nèi)。置信限列在QC報(bào)告中。

13. 不要在測(cè)試中混合不同批號(hào)的試劑盒組分，并且不要使用試劑盒標(biāo)簽上顯示的過(guò)期日期之后的試劑。

14. 避免與含有0.25 M H2SO4的終止溶液接觸。它可能會(huì)引起皮膚刺激和灼傷。如果與眼睛或皮膚接觸，請(qǐng)立即用大量水沖洗。

15. TMB底物對(duì)皮膚和粘膜有刺激性。如果可能接觸，請(qǐng)用大量水沖洗眼睛，用肥皂和大量水清洗皮膚。在重復(fù)使用之前清洗受污染的物品。

16. 有關(guān)試劑盒中包含的危險(xiǎn)物質(zhì)的信息，請(qǐng)參考安全數(shù)據(jù)表（SDS）。此產(chǎn)品的安全數(shù)據(jù)表可直接在ALPCO的網(wǎng)站上獲取。

17. 試劑盒試劑必須被視為危險(xiǎn)廢物，并根據(jù)國(guó)家規(guī)定進(jìn)行處理。

18. 如果試劑盒或組分有任何嚴(yán)重?fù)p壞，必須在收到試劑盒后1周內(nèi)書面通知ALPCO。嚴(yán)重?fù)p壞的單個(gè)組分不得用于測(cè)試運(yùn)行。它們必須得到妥善存放，直到確定下一步。如果確定它們不再適合測(cè)量，它們必須按照國(guó)家規(guī)定進(jìn)行處理。

結(jié)果的計(jì)算

文獻(xiàn)參考：

1. de Jong, W.H., et al., Urinary 5-HIAA measurement using automated on-line solid-phase extractionhighperformanceliquid chromatography-tandem mass spectrometry. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed LifeSci, 2008. 868(1 – 2): p. 28 – 33.

2. Meijer, W.G., et al., Discriminating capacity of indole markers in the diagnosis of carcinoid tumors.Clin Chem,2000. 46(10): p. 1588 – 96.

3. Formica, V., et al., The prognostic role of WHO classification, urinary 5-hydroxyindoleacetic acid andliverfunction tests in metastatic neuroendocrine carcinomas of the gastroenteropancreatic tract. Br JCancer, 2007.96(8): p. 1178 – 82.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

作為ALPCO在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。

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