游離甲狀腺素ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量測定人血清中的游離甲狀腺素（fT4）。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品fT4 (FreeThyroxine) EIA試劑盒，(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

fT4 (FreeThyroxine) EIA試劑盒，(96孔)檢測原理：

游離甲狀腺素ELISA是一種固相競爭酶免疫測定法。將血清樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和甲狀腺素酶偶聯(lián)工作試劑加入涂有單克隆甲狀腺素抗體的孔中。樣品中的游離甲狀腺素和甲狀腺素標(biāo)記的結(jié)合物競爭抗體上的可用結(jié)合位點。在室溫下孵育60分鐘后，用水洗滌孔以去除未結(jié)合的甲狀腺素結(jié)合物。然后加入H2O2/TMB溶液并孵育20分鐘，導(dǎo)致藍(lán)色的發(fā)展。加入3N HCl停止顯色，在450nm處用分光光度法測量吸光度。形成的顏色強度與存在的酶的量成正比，與樣品中未標(biāo)記的游離甲狀腺素的量成反比。通過參考一系列以相同方式測定的游離甲狀腺素標(biāo)準(zhǔn)品，對未知樣品中游離甲狀腺素的濃度進(jìn)行定量。

試劑

試劑盒提供的材料：

- 抗體涂層微孔板，96孔 - 涂有抗T4抗體

- fT4-酶結(jié)合物試劑，即用型，1瓶，10.5 mL - 含有與辣根過氧化物酶結(jié)合的T4抗體和防腐劑

- 自由T4參考標(biāo)準(zhǔn)套裝 - 六瓶血清參考fT4，近似*濃度為0, 0.4, 1.1, 2.2, 4.1和8.0 ng/dL，已添加防腐劑；液體，即用型，每瓶1 mL

  *具體水平在批次特定的標(biāo)簽上給出

  *對于國際單位制，1ng/dL x 12.9 = pmol/L

- 顯色試劑A，1瓶，13 mL - 含有醋酸緩沖液中的過氧化氫

- 顯色試劑B，1瓶，13 mL - 含有在緩沖溶液中穩(wěn)定的3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺（TMB）

- 停止溶液（3N鹽酸），1瓶，10 mL - 含有稀釋的鹽酸

需要但不提供的試劑：

- 能夠提供50 ?L體積，精度優(yōu)于1.5%的移液管

- 能夠重復(fù)提供50 ?L和200 ?L體積，精度優(yōu)于1.5%的分配器

- 具有450 nm波長吸收能力的微孔板讀取器

- 用于混合顯色試劑A與顯色試劑B的試管

- 用于洗板后吸干的吸水紙

- 計時器

- 質(zhì)量控制材料

試劑盒和儀器的儲存

未開封的試劑盒在收到后應(yīng)存放在2-8°C，并應(yīng)將微孔板保存在帶有干燥劑的密封袋中，以盡量減少潮濕空氣的接觸。按照上述描述儲存的開封試劑盒，直到顯示的有效期前都保持穩(wěn)定。在450 nm波長下，具有10 nm或更小帶寬和0 - 2.0 OD或更大光密度范圍的微孔板讀取器適用于吸收測量。

標(biāo)準(zhǔn)曲線示例：

程序的局限性：

1. 當(dāng)對使用說明書有完整理解并遵守良好實驗室規(guī)范時，將獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。

2. 洗滌程序至關(guān)重要。洗滌不充分會導(dǎo)致精度差和錯誤的高吸光度讀數(shù)。

3. 顯示嚴(yán)重脂血、嚴(yán)重溶血或渾濁的血清樣本不應(yīng)使用此測試。

4. 如果設(shè)備未能正常工作，請聯(lián)系A(chǔ)LPCO。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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