用于定量測定人血清中總甲狀腺素（T4）濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品 總甲狀腺素ELISA（總T4 ELISA）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

 總甲狀腺素ELISA（總T4 ELISA）檢測原理：

在T4酶免疫測定（EIA）中，微孔板孔上包被了一定量的抗T4抗體。將一定量的樣本和一定量的與辣根過氧化物酶結(jié)合的T4添加到微孔板孔中。在孵育過程中，T4和結(jié)合的T4競爭抗T4抗體上的有限結(jié)合位點。在室溫下孵育60分鐘后，用水潤洗孔5次以去除未結(jié)合的T4結(jié)合物。然后加入TMB試劑溶液并孵育20分鐘，導(dǎo)致藍色出現(xiàn)。通過加入停止溶液停止顏色發(fā)展，然后在450nm處用分光光度計測量吸光度。形成的色度強度與存在的酶量成正比，與樣本中未標(biāo)記T4的量成反比。通過參考以同樣方式測定的一系列T4標(biāo)準(zhǔn)品，可以定量未知樣本中T4的濃度。

測定程序

1. 將所需數(shù)量的包被孔固定在支架中。

2. 將25?L的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對照品（未包含）移液至相應(yīng)的孔中。

3. 向每個孔中加入100 ?L的工作結(jié)合試劑。

4. c底混合30秒。w全混合非常重要。

5. 在室溫（18-25°C）下孵育60分鐘。

6. 將孵育混合物通過甩動板子內(nèi)容物到廢物容器中移除。

7. 用蒸餾水沖洗微孔板5次，并甩動。

8. 將孔猛擊在吸水紙或紙巾上，以去除所有殘留水滴。

9. 向每個孔中分發(fā)100?L的TMB試劑。輕輕混合10秒。

10. 在室溫下，避光孵育20分鐘。

11. 通過向每個孔中加入100?L的停止溶液來停止反應(yīng)。

12. 輕輕混合30秒。確保所有的藍色w全變?yōu)辄S色。

13. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板讀取器讀取450nm的吸光度。

結(jié)果計算

1. 計算參考標(biāo)準(zhǔn)、對照品和樣本的重復(fù)組的平均吸光度值（OD450）。

2. 通過在對數(shù)-對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制每個參考標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與其濃度（?g/dL）的標(biāo)準(zhǔn)曲線，吸光度在垂直（y）軸上，濃度在水平（x）軸上。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的T4濃度（?g/dL）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線示例：

下面展示了一個典型的標(biāo)準(zhǔn)運行結(jié)果，其中450納米處的光密度讀數(shù)顯示在Y軸上，而總T4濃度（?g/dL）顯示在X軸上。注意：標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供說明之用，不應(yīng)用來計算未知值。每個實驗室必須為每次測定運行提供自己的數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。

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