用于人血清中促甲狀腺激素（TSH）的定量測定。僅供研究使用。診斷程序中使用的注意事項。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品促甲狀腺激素（TSH）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

促甲狀腺激素（TSH）ELISA檢測原理：

促甲狀腺激素（TSH）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）基于固相酶聯(lián)免疫吸附測定的原理。該測定系統(tǒng)利用一種d特的單克隆抗體，針對完整的TSH分子上的一個d特抗原決定簇。小鼠單克隆抗TSH抗體用于固相固定（在微孔板孔上）。山羊抗TSH抗體在抗體-酶（辣根過氧化物酶）結(jié)合溶液中。樣本被允許與兩種抗體同時反應，導致TSH分子被夾在固相和酶聯(lián)抗體之間。在室溫下孵育60分鐘或過夜后，用水潤洗孔以去除未結(jié)合的標記抗體。加入TMB溶液并孵育20分鐘，導致藍色出現(xiàn)。通過加入停止溶液（1N鹽酸），顏色發(fā)展停止，顏色變?yōu)辄S色。TSH的濃度與測試樣本的顏色強度成正比。在450納米處用分光光度計測量吸光度。

試劑材料

試劑盒提供的物料：

1. 抗體包被孔（1板，96孔）：用小鼠單克隆抗TSH抗體包被的微孔板。

2. 酶結(jié)合試劑（1瓶，13 mL）：含有與辣根過氧化物酶結(jié)合的山羊抗TSH抗體。

3. 參考標準組[標準1-6]（每級1瓶；共6瓶）：含有0, 0.5, 2, 5, 10和25 ?IU/mL（WHO, 第2次國際參考品，80/558）的TSH，溶于含防腐劑的馬血清中，凍干。

4. TMB試劑（1瓶，11 mL）：含有在緩沖溶液中穩(wěn)定的3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。

5. 停止溶液（1N鹽酸），1瓶，11 mL 含有稀釋的鹽酸。

試劑盒未提供的物料：

1. 蒸餾水或去離子水

2. 精密移液管：50 ?L, 100 ?L, 200 ?L 和 1 mL

3. 一次性移液管頭

4. 漩渦混合器或同等設備

5. 能夠讀取450nm吸光度的微孔板讀取器

6. 吸水紙

7. 坐標紙（半對數(shù)等）

8. 質(zhì)量控制材料（例如，BioRad Lyphochek對照血清）

9. 計時器

試劑盒的儲存

收到后未開封的試劑盒應存放在2-8°C的環(huán)境中，并且在不使用時，直到試劑盒標簽上顯示的有效期為止。參考包裝標簽上的有效期。除凍干標準品外，開封并使用過的試劑，如果適當儲存在2-8°C，直到有效期都是穩(wěn)定的。重懸的標準品在2-8°C密封儲存時，穩(wěn)定期長達30天。將微孔板存放在帶有干燥劑的密封袋中，以減少潮濕空氣的接觸。

儀器

450納米波長下帶寬為10納米或更小，光密度范圍為0-2 OD或更大的微孔板讀取器適用于吸光度測量。

樣本收集和準備

應從通過可接受技術獲得的全血樣本中制備血清。本試劑盒僅適用于無添加劑的血清樣本。避免使用明顯溶血、脂血或渾濁的樣本。樣本應加蓋，并可在2-8°C下儲存長達48小時，然后用于測定。需要更長時間儲存的樣本應僅在-20°C下冷凍一次，然后使用。解凍的樣本在測試前應多次倒置。

標準曲線示例:

該測定的典型標準運行結(jié)果如下所示。標準曲線僅用于說明，不應用于計算未知值。標準曲線涵蓋了0至25?IU/mL的動態(tài)范圍。由于在不同實驗室的不同室溫下孵育，吸光度（450 nm）值可能會有所不同。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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