人胎盤催乳素ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量測定血清中的人胎盤催乳素（hPL）。僅供研究使用。不適用于獨立程序

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品人胎盤催乳素（HPL）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人胎盤催乳素（HPL）ELISA檢測原理：

hPL ELISA試劑盒是基于上述原理的固相酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。微量滴定孔涂有針對hPL分子d特抗原位點的單克隆[小鼠]抗體。將含有內源性hPL的樣品等分試樣與酶偶聯(lián)物在包被孔中孵育，酶偶聯(lián)物是一種與辣根過氧化物酶偶聯(lián)的抗hPL抗體。孵育后，洗掉未結合的結合物。結合的過氧化物酶的量與樣品中hPL的濃度成正比。加入底物溶液后，顯色強度與樣品中hPL的濃度成正比。

檢測程序注意事項：手動移液：建議每次檢測運行不要使用超過32個孔。所有標準品、樣本和對照品的移液應在3分鐘內完成。自動移液：每次檢測運行可以使用96孔的完整板。然而，建議所有標準品、樣本和對照品的移液在3分鐘內完成。每次運行必須包括一個標準曲線。

1. 在架子上固定所需數(shù)量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸頭，向適當?shù)目字蟹謩e加入10 ?L的標準品、對照品和預稀釋樣本。

3. 向每個孔中加入100 ?L的酶結合物。c底混合10秒鐘。這一步w全混合非常重要。

4. 在室溫下孵化30分鐘。

5. 迅速搖動孔內液體。用蒸餾水（每個孔300 ?L）沖洗孔5次。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴。重要注意事項：洗滌程序的正確執(zhí)行對本檢測的靈敏度和精確度有很大影響！

6. 向每個孔中加入100 ?L的底物溶液。

7. 在室溫下孵化10分鐘。

8. 通過向每個孔中加入50 ?L的終止液來停止酶促反應。

9. 使用微孔板讀取器，在450 ± 10 nm處測定每個孔的吸光度（OD）。建議在加入終止液后10分鐘內讀取孔。

結果計算

1. 計算每組標準品、對照品和樣本的平均吸光度值。

2. 使用半對數(shù)坐標紙，通過將每個標準品的平均吸光度與其濃度繪制在圖表上，吸光度值在垂直（Y）軸上，濃度在水平（X）軸上，構建標準曲線。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值，從標準曲線上確定相應的濃度。

4. 自動方法：使用說明書中的結果已使用4參數(shù)曲線擬合自動計算。（s選4參數(shù)Rodbard或4參數(shù)Marquardt方法。）其他數(shù)據(jù)簡化功能可能會給出略有不同的結果。

5. 樣本的濃度可以直接從這個標準曲線上讀取。濃度高于最高標準品的樣本必須進一步稀釋或報告為> 20 mg/L。在計算濃度時，必須考慮這個稀釋因子。

結果的可靠性

測試必須嚴格按照制造商的使用說明進行。此外，用戶必須嚴格遵守GLP（良好實驗室規(guī)范）或其他適用的國家標準和/或法律。這對于使用對照試劑尤為重要。在測試程序中始終包含足夠數(shù)量的對照對于驗證測試的準確性和精確性是重要的。只有在所有對照都在z定范圍內，且所有其他測試參數(shù)也在給定的測試規(guī)格內時，測試結果才有效。如有任何疑問或擔憂，請聯(lián)系ALPCO。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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