本檢測(cè)試劑盒用于定量樣本中的總膠原蛋白含量。

作為Chondrex在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Chondrex熱銷產(chǎn)品紅細(xì)胞膠原蛋白檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

紅細(xì)胞膠原蛋白檢測(cè)試劑盒：

形式：96孔ELISA板，配有可拆卸條。

檢測(cè)類型：比色法檢測(cè)。

檢測(cè)時(shí)間：30分鐘。

標(biāo)準(zhǔn)范圍：500 ?g/ml至8 ?g/ml。

樣本數(shù)量：每板最多可處理40個(gè)（重復(fù)）樣本。

樣本類型：組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)基和培養(yǎng)細(xì)胞。

推薦樣本稀釋倍數(shù)：根據(jù)樣本類型而異。

色原：不適用（在510-550 nm讀?。?。

存儲(chǔ)：-20°C保存12個(gè)月。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：不適用。

注釋：本產(chǎn)品不是Sirius Red總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒（編號(hào)：9062P）。

培養(yǎng)基

含有高濃度血清的樣本可能會(huì)導(dǎo)致高背景值。因此，Chondrex公司建議將細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清補(bǔ)充濃度減少到5%，可以使用PBS進(jìn)行稀釋。

樣本濃縮

培養(yǎng)基中的膠原蛋白濃度通常較低，因此在本試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)難以檢測(cè)到膠原蛋白。Chondrex公司推薦使用我們的濃縮溶液（編號(hào)：90626）進(jìn)行樣本濃縮。此外，使用培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，因?yàn)樵摑饪s方法可能會(huì)導(dǎo)致背景水平升高。

取1毫升培養(yǎng)基。

添加250微升濃縮溶液。

渦旋并在4°C孵育16-24小時(shí)。

以10,000 rpm離心3分鐘。

丟棄上清液。

添加100微升0.05M醋酸溶液以溶解沉淀。將此溶液作為樣本使用。

計(jì)算的膠原蛋白濃度應(yīng)乘以0.1的稀釋因子。

結(jié)果計(jì)算

平均標(biāo)準(zhǔn)、空白（B）和測(cè)試樣本的重復(fù)OD值。

從標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)試樣本的平均OD值中減去空白（B）值。

將標(biāo)準(zhǔn)的OD值繪制在y軸上，標(biāo)準(zhǔn)濃度（?g/ml）繪制在x軸上。圖1展示了該檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線示例。

測(cè)試樣本中膠原蛋白的濃度（?g/ml）可以通過回歸分析計(jì)算。乘以樣本稀釋因子以獲得原始樣本中的膠原蛋白濃度。

如果樣本的OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，則需要進(jìn)一步稀釋或濃縮樣本。

Chondrex成立于1996年，致力于開發(fā)和生產(chǎn)高純度膠原蛋白、抗膠原蛋白單克隆抗體和多種ELISA試劑盒等產(chǎn)品，為研究人員提供研究類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis ,RA)發(fā)病機(jī)制和篩選潛在治療方法所需的工具。Chondrex生產(chǎn)400多種免疫學(xué)研究產(chǎn)品，涵蓋腎炎、結(jié)腸炎和過敏性哮喘等一系列自身免疫性疾病模型。此外，還開發(fā)了炎癥相關(guān)產(chǎn)品，如細(xì)菌毒素抗體ELISA、細(xì)胞因子檢測(cè)ELISA等。

作為Chondrex在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的Chondrex產(chǎn)品。

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