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            顆粒酶A(GZMA)活性蛋白

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2023-04-10 16:30:35瀏覽次數(shù):531

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
            應用領域 化工 主要用途 用于科研
            英文名稱 Active Granzyme A (GZMA) 物種 Homo sapiens (Human,人)
            來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
            顆粒酶A(GZMA)活性蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:IL32重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標簽) Protein
            乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白 Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)
            HA重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (H

            詳細介紹

            標簽選擇:

            親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

            不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

            真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

            a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

            b.      表達載體的構建

            c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

            d.      細胞瞬時轉染

            e.      表達小試,條件優(yōu)化

            f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

            g.      大量表達

            h.      親和純化

            i.        檢測和鑒定

            僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            物種

            性狀

            來源

            顆粒酶A(GZMA)活性蛋白

            Homo sapiens (Human,人)

            凍干粉

            原核表達

            英文名稱:Active Granzyme A (GZMA)

            CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1

            酶與激酶 感染免疫 免疫分子

            物種:Homo sapiens (Human,人)

            緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

            性狀:凍干粉

            純度:> 97%

            等電點:9.2應用:Cell culture; Activity Assays.

            規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

            相關產(chǎn)品:

            乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白 Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)

            AMICA1 Protein Human 重組人 JAML / AMICA 蛋白 (His 標簽)

            IL32重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標簽) Protein

            BMP2 Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白

            HA重組甲型流感 H5N1 (A/go

            1.png

            原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

            a.      選擇表達載體

            b.      密碼子優(yōu)化

            c.      基因合成/亞克隆

            d.      轉化表達菌株

            e.      蛋白表達小試分析

            f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

            g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

            h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

            GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

              誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

            操作步驟 :

            根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

            1、樣品前處理:

            a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

            b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

            c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

            2、后處理:

            將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

            巴貝斯屬蟲通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Babesia spp.PCR 50T

            奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Allpaahuayo virus(ALLV)RTPCR 50T

            艾美耳球蟲屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Eimeria spp.PCR 50T

            阿馬帕里病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Amapari virus(AMAV)RTPCR 50T

            mouse Caspase-2 小鼠Caspase-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

            Anti-FLIP S/L 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

            Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

            Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit 人α半乳糖基抗體 96T

            Syntrophin-2 英文名稱: 互養(yǎng)蛋白2抗體 0.1ml

            CCDC83 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白83抗體 0.1ml

            Anti-FLIP S/L 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

            顆粒酶A(GZMA)活性蛋白擠奶工結節(jié)病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Milker's Nodule Virus(MNV)PCR

            嵴病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; KobuvirusRTPCR

            棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Echinococcus spp.PCR

            棘盤瑞氏絳蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Raillietina echinobothridaPCR

            注意事項:  

            1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

            2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

            3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

            4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

            5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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