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            半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白

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            • 半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白

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            更新時間:2023-04-10 16:11:13瀏覽次數(shù):323

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
            應用領域 化工 主要用途 用于科研
            英文名稱 Recombinant Galactose-1-Phosphate Uridylyltra 物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
            來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
            半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:ST6GAL1重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標簽) Protein
            RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)重組蛋白 Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)
            CRELD1重組人 CRELD1 蛋白 (His 標簽) Protein

            詳細介紹

            蛋白表達及純化:

            1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

            2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

            3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

            4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

            5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

            產(chǎn)品名稱:半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白

             英文名稱:Recombinant Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase (GALT)

            UDP-glucose--hexose-1-phosphate uridylyltransferase

            酶與激酶

            物種:Rattus   norvegicus (Rat,大鼠)

            來源:原核表達

            宿主E.coli

            內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

            亞細胞定位::高爾基體

            預測分子量:47.0kDa

            實際分子量:47kDa(差異分析請參閱說明書)

            片段與標簽:Met1~Ala379   with N-terminal His Tag

            緩沖液成份:PBS,   pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

            性狀:凍干粉

            純度:>   90%

            等電點:6.1

            應用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

            規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

             

            相關產(chǎn)品:

            二氫轉(zhuǎn)乙?;?span>(DLAT)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)

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            CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白 (Fc 標簽)

            NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白 (Fc

            樣品要求:

            1、待標記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標記物結合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹俗⒄f明。

            2、待標記樣品最小標記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應大于1mg/ml。

            3、抗體IgG樣品中應不含BSA、疊氮鈉成分。

            4、大分子蛋白應提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結構式。

            5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。

            特性

            重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意,這些都是用戶在實際應用中經(jīng)常遇到的問題。

            (1)原核細胞表達的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護劑,使用過濾后的無菌水作為復溶劑即可,復溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進行快速振蕩或劇烈搖晃。

            (2)真核細胞表達的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細胞中進行,如哺乳動物細胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工,這樣表達的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

            (3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護劑。在凍干和儲存過程中常用的保護劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結構改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應用的凍干保護劑和填充劑。

            操作步驟:

            實體組織蛋白的提取

            1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

            2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

            3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min

            4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            5. 分裝保存于-70,避免反復凍融。

            培養(yǎng)細胞蛋白提取

            1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

            2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

            3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

            4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

            細胞數(shù)量

            Lysis Buffer加入量

            107

            0.5 mL1 mL

            5×106

            0.2 mL0.5 mL

            5.置于4搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

            6 14,000rpm4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            7. 分裝保存于-70,避免反復凍融

            公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

            雞傳染性喉氣管炎病毒即禽皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Infectious Laryngotracheitis Virus(AILTV)(1)PCR 50T

            火雞星狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Turkey Astrovirus(TAstV)RTPCR 50T

            活動錐蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trypanosoma vivaxPCR 50T

            黃頭病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Yellow Head Virus(YHV)RTPCR 50T

            Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

            Anti-ASPP2/p53BP2 P53凋亡刺激蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

            Rhesus antibody Rh phospho-AQP2(Ser261) 0酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

            tau 濃縮液 0.1ml 進口分裝

            Ube2L3 英文名稱: 泛素蛋白連接酶L3抗體 0.2ml

            DHRS7 英文名稱: 視網(wǎng)膜短鏈脫氫酶/還原酶家族7抗體 0.2ml

            Anti-ASPP2/p53BP2 P53凋亡刺激蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

            半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白口腔支原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycoplasma oralePCR

            口腔鏈球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Streptococcus oralisPCR

            空腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Campylobacter jejuniPCR

            肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella kentuckyPCR


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