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            抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白

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            更新時間:2023-03-31 13:20:06瀏覽次數(shù):318

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
            應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實驗
            英文名稱 Recombinant Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1) 物種 Homo sapiens (Human,人)
            來源 原核表達 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
            抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:高溫需求因子A4(HTRA4)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源;

            詳細介紹

            公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

            產(chǎn)品名稱:抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白

             英文名稱:Recombinant Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1)

            OAZI; OAZIN; ODC1L; Ornithine Decarboxylase Antizyme Inhibitor; Ornithine Decarboxylase 1-Like

            信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶

            物種:Homo   sapiens (Human,人)

            來源:原核表達

            宿主E.coli

            內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

            亞細胞定位::n/a

            預(yù)測分子量:34.8kDa

            實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

            片段與標(biāo)簽:Ile5~Lys290   with

            緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

            性狀:凍干粉

            純度:>   95%

            等電點:-

            應(yīng)用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

            規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

             

            樣品要求:

            1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹?biāo)注說明。

            2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml。

            3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。

            4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

            5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。
            相關(guān)產(chǎn)品:

            色氨酰tRNA合成酶(WARS)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

            三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

            天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

            蛋白表達及純化:

            1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

            2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

            3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

            4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

            5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

            特性

            重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意,這些都是用戶在實際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

            (1)原核細胞表達的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進行快速振蕩或劇烈搖晃。

            (2)真核細胞表達的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細胞中進行,如哺乳動物細胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工,這樣表達的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

            (3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護劑。在凍干和儲存過程中常用的保護劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護劑和填充劑。

            豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)RTPCR

            豬葡萄球菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Staphylococcus hyicusPCR

            豬螺桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Helicobacter suisPCR

            豬痢疾短PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Brachyspira hyodisenteriaePCR

            VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 (Vascular Epidemal growth factor receptor-2) 血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

            Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

            Rhesus antibody Rh PCID2 PCID2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

            HPX Kit Human Hemopexin / HPX ELISA配對抗體 ELISA

            Tau421 英文名稱: 微管相關(guān)蛋白Tau421抗體 0.2ml

            RSL1D1 英文名稱: 細胞衰老抑制基因抗體 0.2ml

            Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

            抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白光滑念珠菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Candida glabrataPCR

            鮭魚立克次氏體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Piscirickettsia salmonisPCR

            哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Hazara VirusRTPCR

            海水派琴蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Perkinsus marinusPCR

            操作步驟:

            實體組織蛋白的提取

            1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

            2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

            3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min;

            4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            5. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融。

            培養(yǎng)細胞蛋白提取

            1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

            2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

            3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

            4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

            細胞數(shù)量

            Lysis Buffer加入量

            107

            0.5 mL1 mL

            5×106

            0.2 mL0.5 mL

            5.置于4搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

            6 14,000rpm4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            7. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融

             


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