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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系大豆DP356043染料法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | Dyestuff qPCR kit for transgenic soybean dp356043 |
貨號(hào) | YSP96673 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
細(xì)胞周期素G2(CCNG2) 規(guī)格：1g 英文：SDF1
細(xì)胞周期素H(CCNH) 規(guī)格：1g 英文：STAG3
細(xì)胞周期素I(CCNI) 規(guī)格：1.0g 英文：STAG2
細(xì)胞周期素I2(CCNI2) 規(guī)格：1.5g 英文：STAG1
細(xì)胞周期素J(CCNJ) 規(guī)格：20mg 英文：MMP9
細(xì)胞周期素K(CCNK) 規(guī)格：20mg 英文：MMP8
細(xì)胞周期素L1(CCNL1) 規(guī)格：1ml 英文：MMP7
細(xì)胞周期素L2(CCNL2) 規(guī)格：2.2ml/支 英文：MMP3
細(xì)胞周期素M1(CCNM1) 規(guī)格：2g 英文：MMP28
細(xì)胞周期素M2(CCNM2) 規(guī)格：100mg 英文：MMP27
細(xì)胞周期素M3(CCNM3) 規(guī)格：100mg 英文：MMP26
細(xì)胞周期素M4(CCNM4) 規(guī)格：1mg/支 英文：MMP24
細(xì)胞周期素O(CCNO) 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 英文：MMP23B
細(xì)胞周期素T(CCNT) 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 英文：MMP23A
細(xì)胞周期素T2(CCNT2) 規(guī)格：HPLC≥98%;5mg/支 英文：MMP21
Drospirenone己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式：C8H6O4 純度：99.0%
Lynestrenol乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式：C8H10O3 純度：98.0%
Norethindrone茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) 分子式：C18H12O9 性狀：Yellow powder 純度：95.0%
Allylestrenol癸二酸二辛酯（DOS）(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) 分子式：C14H20O7 純度：98.0%
Estradiol diproppionate1，4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 分子式：C7H6O3 純度：99.0%
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate1,2,4-丁三醇（BT）(standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式：C16H16O3 純度：99.0%
Estradiol hexahydrobenzoate癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) 分子式：C11H14O3 純度：97.0%
Estradiol heptanoate月桂酸甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式：C13H16O8 純度：98.0%
Estradiol valerate棕櫚酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) 分子式：C27H40O2 性狀：Oil 純度：97.5%
轉(zhuǎn)基因品系大豆DP356043染料法qPCR試劑盒唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 英文縮寫：Cux2
CD329抗體 英文縮寫：CWC22
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗體 英文縮寫：CWF19L1
1號(hào)染色體開放閱讀框57抗體 英文縮寫：CWH43
2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體 英文縮寫：Cx32(Connexin-32)
細(xì)胞色素c氧化酶6抗體 英文縮寫：CX36 (Connexin-36)
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24抗體 英文縮寫：CX3CL1
巨噬細(xì)胞炎性蛋白15 英文縮寫：cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白抗體 英文縮寫：CX3CR1
CD72蛋白抗體 英文縮寫：CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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