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詳細介紹
產(chǎn)品僅用于科研注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系水稻KF6探針法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | QPCR kit of transgenic rice line kf6 probe method |
貨號 | YSP96612 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
細胞MAPKAP KINASE3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織MAPKAP KINASE3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：棕褐粉狀
25KG/紙板桶可拆
細胞MAPKAP KINASE5激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：紅黑顆粒
25KG/紙板桶可拆
組織MAPKAP KINASE5激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
細胞MEK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織MEK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
細胞MKK6激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織MKK6激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：土白片狀
25KG/紙板桶可拆
細胞MSK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）6次/盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：棕紅顆粒
25KG/紙板桶可拆
細胞MSK2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）100ml外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織MSK2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：酞青條狀
25KG/紙板桶可拆
細胞NEK2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）3×1ml外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織NEK2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
細胞NEK6激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
組織NEK6激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）外觀包裝：深褐塊狀
25KG/紙板桶可拆
轉(zhuǎn)基因品系水稻KF6探針法qPCR試劑盒C-肽抗體 英文縮寫：CHD3
鈣結(jié)合蛋白抗體 英文縮寫：CHD4
C-反應(yīng)蛋白抗體 英文縮寫：CHD6
C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 英文縮寫：CHD7
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 英文縮寫：CHD8
促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 英文縮寫：CHD9
促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 英文縮寫：CHEK2
5號染色體開放閱讀框54抗體 英文縮寫：chemerin
CD93抗體 英文縮寫：Chemokine Receptor D6
嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL6抗體 英文縮寫：CHERP
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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