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            上海研生實業(yè)有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>>轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒

            轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒

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            • 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2023-03-23 14:11:24瀏覽次數(shù):282

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 產(chǎn)品僅用于科研
            儲存條件 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融 分類 PCR檢測試劑盒
            轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)PCR檢測試劑盒 50T
            Rat hepatocyte growth factor (HGF) 大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)PCR檢測試劑盒
            Humansphingomyelin,SMELISAKit 人鞘0脂(SM)PCR檢測試劑盒 50T 進(jìn)口分裝
            ChickenAlternativemacrophageact

            詳細(xì)介紹

            特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

            產(chǎn)品名稱

            分類

            規(guī)格

            轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒

            PCR檢測試劑盒

            50T

            儲存條件:
            僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
            1.
            血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
            2.
            血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
            3.
            細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
            4.
            組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
            5.
            保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20
            ,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

            詳1.png

            定量PCR方法:

            熒光定量PCR探針法

            熒光定量PCR SYBR Green染料法

            快速PCR

            多重 PCR

            探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),這個時候,兩個平衡不發(fā)光,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),兩個距離較遠(yuǎn),發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機器收集到信號,從而檢測基因的量

            染料能夠與雙鏈結(jié)合,當(dāng)PCR擴增的時候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。

            在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,卻能維持較高的擴增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

            多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


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            小鼠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)PCR檢測試劑盒 ,英文名: GDNF

            牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA檢測試劑盒BovineHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 50T

            apelin 13(AP13)免疫試劑盒 Human apelin 13,AP13

            英文名稱MouseIerleukin-3,IL-3ELISAKIT小鼠白介素3(IL-3)

            冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒50

            Ratcholesterolesteransferprotein,CETPPC
            PCR實驗步驟:
            取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
            兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
            RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
            RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>47000rpm離心5分鐘。
            RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
            溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
            小鼠天冬酸轉(zhuǎn)酶2(AST2)ELISA試劑盒 ,英文名: AST2 ELISA Kit

            豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T

            牛抗Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒 Bovine Thrombin-aithrombin III Complex,TAT-III ELISA Kit

            英文名稱HumanMyoglobinELISAKit人肌紅蛋白(MYO)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

            動物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

            RatProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒大鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
            Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740) /FITC
            熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

            Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

            內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1ECE1抗體 Anti-ECE1 0.1ml

            Rabbit Anti-human sIgA/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

            FBXO27 英文名稱: FBXO27蛋白抗體 0.2ml

            Rhesus antibody Rh Phospho-Tie2 (Ser1119) 0酸化血管生成素受體2抗體 規(guī)格 0.1ml

            Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
            轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒大鼠轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)ELISA試劑盒 ,英文名: TAGLN ELISA Kit

            Mouse ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒

            Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

            CLIAKitforHumanLeishimariaaibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體規(guī)格:48T/96T

            脘蛋白基因變異分析試劑盒20

            ELISAKitEMAIgA大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA規(guī)格:48T/96T
            使用方法
            一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
            1.
            標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,54,3,2
            2.
            用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
            3.
            7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            4.
            換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            5.
            換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            6.
            重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            二、樣品 DNA 的制備
            7.
            用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
            8.
            如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
            三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
            9.
            如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。


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