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            進口elisa試劑盒競爭抑制法基本操作問題分析

            閱讀:435          發(fā)布時間:2018-8-7

                進口elisa試劑盒兩對半使用elisa方法,其中HBSAg、HBsAb、HBeAg使用雙抗原/抗體夾心法檢測,而HBcAb、HBeAb使用競爭抑制法檢測。 而競爭抑制法的原理:酶標(biāo)抗體與樣本抗體在同樣的體系中,與固相抗原競爭結(jié)合是等比關(guān)系。原論上講,應(yīng)該先將樣本與酶標(biāo)抗體先行混勻,然后加入反應(yīng)也進行。但實際工作中并非如此,都是分開加入反應(yīng)孔。這樣會造成先加入的先結(jié)合,與后加入者并不是公平的關(guān)系,因而也不符合等比原則。特別是在放置時間長,且溫度高的情況下,對結(jié)果有很大的影響。

                將陰性標(biāo)本94份并用生理鹽水進行1:30稀釋,ELISA試劑盒SCI文章在加入標(biāo)本后按下表時間放置后再加入酶標(biāo)抗體,然后檢測結(jié)果如下:

            放置時間(min)陰性標(biāo)本數(shù)臨界值-標(biāo)本A450nm值假陽性率(%)<0.30.3~0.7>0.70751036026813767.4565158610.6105616121020.2203818172139.3302112184357.4

                 進口elisa試劑盒從上表可以看出,如果同時加入標(biāo)本與酶標(biāo)抗體,沒出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象。2分鐘后再加入酶標(biāo)抗體,由于標(biāo)本比酶標(biāo)抗體先結(jié)合了兩分鐘,因此出現(xiàn)了7.4%的假陽性。30分鐘后再加,假陽性高達57.4%。因此建議競爭抑制法的項目,加十個樣本后立即加酶標(biāo)抗體,這樣對檢測結(jié)果沒有影響。

             RGS19 VWCE抗體

             RGS2 VSV-G tag標(biāo)簽抗體

             RGS5 v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體

             RHEB/Ras homolog enriched in brain VHL腫瘤抑制因子抗體

             Rho C VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體

             RhoA V5 tag標(biāo)簽抗體

             RICTOR UL16結(jié)合蛋白3抗體

             rInsulin UL16結(jié)合蛋白2抗體

             rInsulin human monoclonal UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體

             rInsulin monoclonal (pig) T細胞特異性趨化因子抗體

             RIP2 T細胞受體γ抗體
            進口elisa試劑盒

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