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進(jìn)口elisa試劑盒技術(shù)和WESTERN的不同?
閱讀：342 發(fā)布時(shí)間：2018-8-17進(jìn)口elisa試劑盒Western Blot與Southern或Northern雜交方法類(lèi)似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類(lèi)型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。
免疫學(xué)三大工具，免疫組化、Western、ELISA，分別用于定位，定性和定量，各有各的功能。
Western用于測(cè)分子量，ELISA用于測(cè)濃度。
他們?cè)跍y(cè)量前都要一個(gè)尺子（標(biāo)準(zhǔn)），但Western的尺子上標(biāo)的是分子量（KD），ELISA的尺子上標(biāo)的是濃度。
Western用的是蛋白MARKER（已知大小的幾條蛋白），與蛋白一起電泳（不同泳道），實(shí)驗(yàn)結(jié)束后知道目標(biāo)蛋白的大小。
進(jìn)口elisa試劑盒用的是標(biāo)準(zhǔn)品（已知濃度的蛋白，自己稀釋成不同濃度），與未知相本一起反應(yīng)（不同孔），實(shí)驗(yàn)結(jié)束后判斷目標(biāo)蛋白的濃度。
至于他們的后期原理，都是用抗體與目標(biāo)蛋白反應(yīng)，再加一個(gè)HRP標(biāo)記的二抗，HRP可以讓DAB顯色（Western是DAB或者ECL發(fā)光，在膜上顯色，而ELISA用TMB顯色，顏色在孔里面，）
當(dāng)然，實(shí)際操作也沒(méi)這么簡(jiǎn)單，但后期利用的原理是相當(dāng)?shù)摹?/p>
KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體 SSDD/Steroid sulfatase
KT3 tag抗體 SSB/La
k輕鏈抗體 SSA/52KDa Ro
Lgr5/GPR49抗體 srGAP3
LIX1抗體 SRG11/Spata17
Lpin1 抗體 SREBP-2
Lpin1 抗體 SRF/SAP2/MCM1
LRIG1抗體 SREBP-1
LRIG2抗體 SRC
LRIG3抗體 SPY
LY75抗體 Spindlin 1
L-瓜氨酸抗體 SPHK2
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