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            PrimaCell™人子宮平滑肌細(xì)胞試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟

            閱讀:154          發(fā)布時(shí)間:2022-3-14

            PrimaCell™人子宮平滑肌細(xì)胞試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:

            a.采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   

            b.立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 

            c.用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。   

            d.用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。   

            e.剔除胚胎周?chē)陌?,將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。   

            f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

            胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):

            用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴(lài)性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代,一般3~4 天傳代一次。

            懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:

            直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋?xiě)腋〖?xì)胞,一般按1:2-1:5 稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

            人星形膠質(zhì)細(xì)胞

            小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)

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            rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓

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            rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞

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            MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

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