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蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測(cè)程序
閱讀：156 發(fā)布時(shí)間：2022-6-8蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測(cè)程序：
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
結(jié)果計(jì)算與判斷
1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。
2. 以標(biāo)準(zhǔn)品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) TIMP-1 含量 即可 。
試劑盒性能
1. 靈敏度 ： 最小的TIMP-1 檢測(cè)濃度小于 31p g/ml。
2. 特異性： 可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠 TIMP-1 。 不與 小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。