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            上海研生實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>人正常組織細胞>>人胚腎細胞;293 HEK-293培養(yǎng)

            人胚腎細胞;293 HEK-293培養(yǎng)

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            • 型號
            • 品牌 ATCC
            • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
            • 所在地 上海市

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            更新時間:2025-03-27 13:30:27瀏覽次數(shù):519

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            應(yīng)用領(lǐng)域 化工    
            人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

            詳細介紹

            細胞名稱  人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)
            形態(tài)特性   上皮樣
            生長特性  貼壁生長 
            特征特性   早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主??杀磉_異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。
            培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS 
            傳代方法   1:10~1:20傳代,每2~3天換液1次。
            傳代情況  P20
            凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
            支原體檢測  培養(yǎng)法(-) 
            STR   Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
            同工酶  
            染色體    
            使用權(quán)限  A類

            人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)操作流程:
            1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
            1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
            1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
            1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
            1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
            1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
            1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
            1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
            人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
            人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。

            Hin6I (HinP1I)規(guī)格:2000 units

            HincII (HindII)規(guī)格:500 units

            HincII (HindII)規(guī)格:2500 units

            HindIII規(guī)格:5000 units

            HindIII規(guī)格:5x5000 units

            HindIII, HC規(guī)格:25000 units

            HindIII規(guī)格:10000 units

            HpaII規(guī)格:1000 units

            HpaII規(guī)格:5000 units

            KpnI規(guī)格:4000 units

            KpnI規(guī)格:5x4000 units

            KpnI, HC規(guī)格:20000 units

            Kpn2I (BspEI)規(guī)格:500 units

            Kpn2I (BspEI)規(guī)格:2500 units

            MspI (HpaII)規(guī)格:3000 units

            MspI (HpaII)規(guī)格:5x3000 units

            MvaI (BstNI)規(guī)格:2000 units

            MluI規(guī)格:1000 units

            MluI規(guī)格:5000 units

            NcoI規(guī)格:500 units

            NcoI規(guī)格:2500 units

            NcoI規(guī)格:1000 units

            NdeI規(guī)格:500 units

            NdeI規(guī)格:2500 units

            非凍型尿液DNA保存液
            非凍型尿液DNA保存液
            非凍型拭子DNA保存液(A型)
            非凍型拭子DNA保存液(B型)
            非凍型血液DNA保存液(100 mL)
            非凍型血液DNA保存液(250 mL)
            非凍型組織DNA保存液(100 mL)
            紅細胞裂解液A型(核酸純化)
            紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用)
            菌體內(nèi)毒素清除劑
            土壤腐殖酸清除劑

            人胚腎細胞;293 [HEK-293]培養(yǎng)一步離心式石蠟清除劑
            動物DNA提取
            96孔板血液DNAout(真空法)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
            96孔板血液DNAout(離心法)(1次)
            96孔板血液DNAout(離心法)(5次)
            FTA血片DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)


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