化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人胚肺細胞VA13細胞；WI-38VA13亞系2RA價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人胚肺細胞VA13細胞；WI-38VA13亞系2RA價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系衍生自WI-38細胞。WI-38細胞感染低滴度的SV40病毒，經(jīng)過連續(xù)傳代、克隆選擇獲得多株亞系，其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉(zhuǎn)移抗原，從而改變其有限細胞系的特性，可在常規(guī)條件下連續(xù)傳代。該細胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
cAMP ELISA Kit 大鼠環(huán)磷酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ARC/FITC 熒光素標記ARC抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM154A FAM154A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T
Angiotensin II Type 2 Receptor 英文名稱： 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml
Annexin A11 英文名稱： 膜粘連蛋白11抗體 0.2ml
Anti-ARC/FITC 熒光素標記ARC抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(人：N端多肽)、內(nèi)臟脂肪素、 又稱：前B細胞克隆增強因子、內(nèi)肥素、腹脂素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh P2Y4 P2Y4受體抗體 規(guī)格 0.1ml
CD86 Kit Rat 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對抗體 ELISA
T2R60 英文名稱： 味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 0.2ml
C3orf26 英文名稱： 3號染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml
Anti-ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒人96T6.25-400 pg/mL小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒，英文名：Cyclin-D2 ELISA Kit人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒人96T0.39-25 ng/mL小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA試劑盒，英文名：HK1 ELISA KiISA Kit for Human Hyaluronidase-4小鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)ELISA試劑盒，英文名：GSTθ1 ELISA Kit人90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠蛋白磷酸酶3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1)ELISA試劑盒，英文名：PPP3R1 ELISA Kit人干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒，英文名：AFM ELISA Kit人犬尿氨酸酶(Kynureninase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒，英文名：HSP90αA1 ELISA Kit人晚期角質(zhì)化包膜蛋白3D (Late cornified envelope protein 3D)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒，英文名：IGF-2 ELISA Kit
人和肽素(CPP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒，英文名：G6PD ELISA Kit人DNA錯配修復蛋白MSH2(hMSH2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒，英文名：AOPP ELISA Kit人Myocardin(MYOCD)ELISA試劑盒人96T0.156-10 nmol/mL大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒，英文名：CIAP ELISA Kit人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒，英文名：AmAC-1 ELISA Kit人磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶和雙特異性蛋白磷酸酶PTEN(PTEN)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒，英文名：HMGB1 ELISA Kit人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒，英文名：PY ELISA Kit人髓鞘脂蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒，英文名：CXCR3 ELISA Kit
細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑 100次
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser471) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
phospho-DDX5 (Tyr593) 英文名稱： 磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體 0.1ml
Sox2 Sox2 鼠單抗 (FITC) Human
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP20 熱休克蛋白-20抗體 規(guī)格 0.2ml
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羥孕酮 96T
PEG3 英文名稱： PEG3蛋白抗體 0.1ml
phospho-CDK5(Tyr15) 英文名稱： 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 0.1ml
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
化工儀器網(wǎng)