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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱：人成骨細(xì)胞試劑盒
規(guī)格：6次/盒
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-IL-17/PE 熒光素PE標(biāo)記白介素-17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Raptor /FITC 熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apelin/Apelin 13 脂肪炎癥因子Apelin抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GPRIN1 英文名稱： G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-Raptor /FITC 熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 原活化蛋白激酶4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
軸蛋白1Axin protein 1抗體 Anti-Axin1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1068) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
B27添加劑 (原裝) 10ml Gibco
ZNF750 英文名稱： 鋅指蛋白750抗體 0.2ml
DTNBP1 英文名稱： 精神分裂癥易感基因抗體 0.1ml
軸蛋白1Axin protein 1抗體 Anti-Axin1 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
VP3 Goose parvovirus 英文名稱： 鵝細(xì)小病毒GPV抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APM2 脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-IL-12/FITC 熒光素標(biāo)記抗白介素12抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human sIgA/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 100ug
Anti-PTEN/MMAC1 /FITC 熒光素標(biāo)記一種抑制基因抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Melamine/Gold 膠體金離子標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化氨基末端激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aurora B/STK-1 有絲分裂激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml
DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformAlpha/ Beta) 末梢同源匡基因多肽片段 0.5mg
人成骨細(xì)胞試劑盒GPR48 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-mouse Kappa light chain/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化氨基末端激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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