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詳細(xì)介紹
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 分類(lèi) |
多里病毒PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)口 | Dhori VirusRTPCR | PCR檢測(cè)試劑盒 |
PCR基本操作：
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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
多里病毒PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)口Phospho-eNOS(Thr495) 化一氧化氮合成酶3體（內(nèi)皮型）進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8體
Notch1/MOTC 跨膜受體蛋白Notch-1體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BTBD6 BTBD6蛋白體
Notch 2 跨膜受體蛋白Notch-2體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)PPO 樣癌特異性相關(guān)原PPO體
Notch3/4 跨膜受體蛋白Notch-3體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)G protein alpha G蛋白α體
NOX2/gp91phox NADPH氧化酶2體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)G protein beta subunit like G蛋白β樣蛋白體
NOXA2/p67phox NADPH氧化酶活化蛋白1體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)CHD3 ATP依賴(lài)的解旋酶CHD3體
Nox4/NADH NADPH氧化酶4體進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)WDR79/TCAB1 端粒酶卡哈爾體蛋白體NF-ATc4英文名稱(chēng)：LRP12視網(wǎng)膜色變性蛋白26體
NETO1英文名稱(chēng)：phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654)過(guò)氧化物酶體肉酰轉(zhuǎn)移酶體
Neurexin 2英文名稱(chēng)：LDL receptor16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7體
Nephrin英文名稱(chēng)：Leptin16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57體
NEGR1英文名稱(chēng)：LMO43號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框37體
Netrin G1/G2英文名稱(chēng)：Lck/p56-LCK3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49體
NG2英文名稱(chēng)：CD85c1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框220體
NDST1英文名稱(chēng)：LTB4-R1/BLTR鈣蛋白1體
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
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