人胃粘膜上皮細胞組織處理緩沖液凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

公司產品僅用于科研
產品名稱：人胃粘膜上皮細胞組織處理緩沖液
規(guī)格：100ml
細胞凍存步驟： 
   待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復蘇細胞步驟：    將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象
FAS/Apo-1/CD95  載脂蛋白1抗體 0.1ml
E  胰羧肽酶E抗體 0.2ml
Myotilin  肌收縮蛋白MYOT抗體 0.1ml
PMCA  細胞膜鈣轉運ATP酶抗體 0.2ml
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3  G氨基丁酸受體α3抗體 0.2ml
NCEH/AADACL1  中性膽固醇酯水解酶1抗體 0.2ml
Rab25  癌基因RAS相關蛋白Rab25抗體 0.2ml
Testis  腫瘤抑制基因Testin抗體 0.2ml
ZNF288/ZBTB20  鋅指蛋白288抗體 0.2ml
ALOX15/15 Lipoxygenase 1  花生四烯酸15脂氧合酶1抗體 0.2ml
ABI3BP  ABI基因家族成員3結合蛋白抗體 0.2ml
MTCBP1/ADI1  膜型基質金屬蛋白酶胞質尾結合蛋白1抗體 0.2ml
BCMP11/AGR3  乳腺癌膜蛋白11抗體（前梯度同源蛋白2） 0.2ml
ALDH1A1  胞質乙醛脫氫酶1抗體 0.2ml
ABH8/ALKBH8  AlkB同源蛋白8抗體 0.2ml
AMFR/Gp78/RNF45  環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體 0.2ml
AMBP/Alpha 1 microglobulin  α1微球蛋白抗體 0.2ml
A2BP1/Fox1  共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體 0.2ml
RLLM1/C14orf166  胰腺癌轉移相關蛋白RLLM1抗體 0.2ml
ABC2/C17orf71  乳腺癌增強蛋白2抗體 0.2ml
CA8  酶相關蛋白8抗體 0.2ml
CACNB1  鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 0.2ml
CDK5RAP3  周期素依賴性激酶5激活結合蛋白C53抗體 0.2ml
CENPH  著絲粒蛋白H抗體 0.2ml
CKAP4  細胞骨架相關蛋白4抗體 0.2ml
CRISP3  富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體 0.2ml
CKMT/Creatine kinase MT  酸性型線粒體肌酸激酶抗體 0.2ml
SCRO/DCUN1D1  鱗狀細胞癌相關蛋白抗體 0.2ml
DDX53/CT26  腫瘤/睪丸抗原26抗體 0.2ml
DEPDC1  細胞周期調控蛋白SDP35抗體 0.2ml
ENTPD5/CD39L4  原癌基因CD39樣蛋白4抗體 0.2ml
EST1A  端粒酶結合蛋白EST1A抗體 0.2ml
EZH1/Histone-lysine N-methyltransferase EZH1  組蛋白賴氨酸N-甲基EZH1抗體 0.2ml
phospho-KMT6/EZH2(Thr487)  磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 0.1ml
SKALP/Elafin  彈性蛋白酶抑制劑抗體 0.2ml
Epsti1/Epithelial Stromal Interaction 1  上皮間質相互作用蛋白1抗體 0.2ml
EIG121  雌激素誘導基因121蛋白抗體 0.2ml
FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein  細胞生長抑制基因39蛋白抗體 0.2ml
人胃粘膜上皮細胞組織處理緩沖液FOLH1B  細胞生長抑制蛋白26抗體（前列腺特異性膜抗原樣蛋白） 0.2ml
GCET2  生發(fā)中心B淋巴細胞相關蛋白2抗體 0.2ml
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線。