化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮采用-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法、差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠胰腺導管上皮原代細胞 | 組織來源 | 胰腺組織 |
英文名稱 | Rat Pancreatic Ductal Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7075 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠胰腺導管上皮細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導管上皮細胞作為胰腺前體細胞，已證實具多向分化潛能，在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細胞，胰腺導管上皮細胞轉分化的胰島樣細胞免疫原性如何，轉分化的胰島樣細胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應，對干細胞臨床治療糖尿病具有重要意義。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
大鼠亞鐵螯合酶(FECH)試劑盒 ，英文名： FECH ELISA Kit
Mouse coagulation factor II (F II) ELISA Kit 小鼠Ⅱ(FⅡ)試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanCollectinELISAKit人膠原凝集素
細胞CDK1/CYCLINB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitu-T4大鼠高敏甲狀腺素
小鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 大鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)試劑盒
Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBcellreceptor,BCR試劑盒人B細胞受體(BCR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物蔗糖合成酶(sucrosesyhase)活性比色法定量試劑盒20次
Humahioredoxieductase,xRELISAKit人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
GGT1重組大鼠 GGT1 蛋白 Protein
Fibulin 1 衰老關鍵蛋白抗原 0.5mgFibulin 1 衰老關鍵蛋白抗原
HSF1重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白 Protein
GPR114 Protein Human 重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標簽)
EPHA4 Protein Mouse 重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細胞裂解液 MA-891(小鼠癌高轉移細胞) CD3D Others Human 人 CD3D 人細胞裂解液 MG-63(人骨肉瘤細胞) 人胰腺上皮細胞 100mL 小鼠原代海綿體內皮細胞 大鼠原代髓核細胞
大鼠胰腺導管上皮原代細胞血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)
CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白
LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
化工儀器網