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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人表皮角化細胞先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人表皮角化原代細胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Human Epidermal Keratinized Cells | 貨號 | YS-01X7333 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人表皮角化細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
野生型人c-kit受體細胞株;A7d 小鼠肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | ATP6IP2： ATP酶H+轉(zhuǎn)運溶酶體輔助蛋白2抗體 0.2ml |
Anti-HDAC10 組蛋白去乙酰化酶10抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABP1 植物生長激素ABP1抗體 規(guī)格 1ml |
Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNAR2/IFNABR 干擾素α受體2抗體 規(guī)格 0.2ml |
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原 0.5mg | HAPLN3： 透明質(zhì)酸及粘蛋白3抗體 0.2ml |
Goat Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的羊抗人IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM46C FAM46C蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) Mouse | Hce-8693 人盲腸腺癌細胞(未分化) |
293T人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T 人胚腎細胞 | CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽) |
人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13 | 人正常細胞;Hs 578Bst |
CM-M121小鼠角膜內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 |
貓源細胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞，COS-1細胞 AtT-20細胞，小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素) | 人表皮角化原代細胞Rhesus antibody Rh IFNAR2/IFNABR 干擾素α受體2抗體 規(guī)格 0.2ml |
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | 人脂肪間充質(zhì)干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) |
BLU-87 人膀胱移行細胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內(nèi)含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 | 主動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8 | Rhesus antibody Rh IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
P53 ELISA Kit 大鼠P53 96T | 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755 |
BCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人兒茶酚胺Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Mycobacterium bovis： 結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 0.1ml | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) Mouse |
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