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詳細介紹
人氣管上皮原代細胞
人氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態(tài)結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。
英文名稱 | Human Tracheal Epithelial Cells | 組織來源 | 氣管 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7035 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人氣管上皮細胞
組織來源：氣管
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
HepG2.2.15細胞，表達HBV病毒的人肝細胞 小鼠胃癌細胞,MFC細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO | ASB17： 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體 0.2ml |
Anti-HLA E 人類白細胞抗原E抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABCG1 三0酸腺苷結合盒亞家族G1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受體(多肽) 0.5mg | HCV-NS1： 丙型肝炎病毒-NS1抗體 0.1ml |
IgG/PE PE標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM150A FAM150A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
MG-63(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells |
BE(2)C細胞，人母細胞瘤細胞 乙型溶血性鏈球菌 人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 | Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
Lewis瘤 肺癌 | GREM1 Protein Mouse 重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽) |
人母細胞瘤細胞;SK-N-SH | Dami(人巨核細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
JAR人胎盤絨毛癌細胞 Human placeal villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS | 人氣管上皮原代細胞Rhesus antibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Ierleukin-9 蛋白 (His 標簽) | PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
LL-PK1細胞，豬腎細胞 人卵巢癌細胞,A2780細胞 人表皮角質細胞-裂解物HEK-a L | 人細胞HN |
II型肺泡上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Rhesus antibody Rh IgG whole serum 兔抗長爪沙鼠IgG抗血清 規(guī)格 1ml |
8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8異前列腺素 96T | CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽) |
CPT1A peptide 肉毒堿棕櫚酰基轉移酶1A多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | DHT(Human Dihydrotestosterone) ELISA Kit 人雙氫睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Msx2： 同源盒基因Msx2抗體 0.2ml | MG-63(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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