化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺癌組織源經(jīng)檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人前列腺癌組織源原代細(xì)胞 | 組織來源 | 前列腺癌組織 |
英文名稱 | Human Prostate Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號(hào) | YS-01X7479 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人前列腺癌組織源細(xì)胞分離自患有前列腺癌病人的前列腺癌組織；前列腺癌是指發(fā)生在前列腺的上皮性惡性腫瘤。2004年WHO《泌尿系統(tǒng)及男性生殖器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中前列腺癌病理類型上包括腺癌（腺泡腺癌）、導(dǎo)管腺癌、尿路上皮癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺鱗癌。其中前列腺腺癌占95%以上，因此，通常我們所說的前列腺癌就是指前列腺腺癌。前列腺癌的發(fā)生與遺傳因素有關(guān)，如果家族中無患前列腺癌者的相對(duì)危險(xiǎn)度為1，絕對(duì)危險(xiǎn)度為8；則遺傳型前列腺癌家族成員患前列腺癌的相對(duì)危險(xiǎn)度為5，絕對(duì)危險(xiǎn)度為35～45。此外，前列腺癌的發(fā)病與性活動(dòng)、飲食習(xí)慣有關(guān)。性活動(dòng)較多者患前列腺癌的風(fēng)險(xiǎn)增加。高脂肪飲食與發(fā)病也有一定關(guān)系。此外，前列腺癌的發(fā)病與種族、地區(qū)、宗教信仰可能有關(guān)。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
Daudi人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 Daudi human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | Rhesus antibody Rh GGT6 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體 規(guī)格 0.2ml |
ES(Human Endostatin) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IFN gamma(F2E4)： γ-干擾素/γ-IFN單克隆抗體 0.1ml | PAF ELISA Kit 大鼠血小板活化因子 96T |
Rhesus antibody Rh RHOBTB1 Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC 熒光素標(biāo)記層粘蛋白α3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser404) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | IL-33 ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞介素33 96T |
IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) | MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞 |
NCI-H661人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
CM-M090小鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪 Human |
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CCCSCK |
小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人前列腺癌組織源原代細(xì)胞PAF ELISA Kit 大鼠血小板活化因子 96T |
透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL | 雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CM-H041人直腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
IFNA7 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | Rhesus antibody Rh APOC2 載脂蛋白C2抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-Bcl-xL (Ser62)： 0酸化Bcl-xL(Ser62)抗體 0.1ml | 人顱蓋造骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17) 羅丹明標(biāo)記白細(xì)胞介素17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PABPC4L： 聚腺苷酸養(yǎng)結(jié)合蛋白4抗體 0.1ml |
Anti-CD166/ALCAM/FITC 熒光素標(biāo)記活化白細(xì)胞粘附分子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
化工儀器網(wǎng)