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詳細介紹
人前列腺成纖維原代細胞
人前列腺成纖維細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的前列腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Human Prostate Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7093 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人前列腺成纖維細胞
組織來源：前列腺
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人前列腺成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人前列腺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | MDC1： DNA損傷關卡蛋白1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MCSF/M-CSF 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TRF1/FITC 熒光素標記端粒結合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1) TGF-β誘導早期應答基因1抗原 0.5mg | anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-Gab2/FITC 熒光素標記接頭蛋白Gab 2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC40A1 細胞膜鐵轉運蛋白FP1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 熒光素標記抗0酸化表皮生長因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 熒光素標記0酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
DAPK3 Others Human 人 DAPK3 / ZIPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人胚肺二倍體細胞;2BS 人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
人脈絡叢上皮細胞總RNAHCPEpiC NA | 小鼠淋巴纖維細胞(MLF)(5×105) |
RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FO(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠腹脊髓元RN-vsc | PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC 人細胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 | 人前列腺成纖維原代細胞anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
APOA1 Others Mouse 小鼠 APOA1 人細胞裂解液 (陽性對照) | RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞 |
盤羊皮膚細胞;ASHS2 | 人小膠質細胞(HM) ( 5×105 ) 人海馬元 Human |
RF/6A猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | GPR113： G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體 0.2ml |
Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人Ⅷ相關抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照) |
促腎上腺皮質激素(1-39)抗體 Anti-ACTH 0.1ml | M-AChR(Human music acetylcholine receptor) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰受體 96T |
Axin 2： 軸抑制蛋白2抗體 0.2ml | DAPK3 Others Human 人 DAPK3 / ZIPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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