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            大鼠Ⅳ型膠原Col Ⅳ酶聯(lián)免疫試劑盒洗板方法

            閱讀:417          發(fā)布時(shí)間:2020-2-27

            大鼠Ⅳ型膠原Col Ⅳ酶聯(lián)免疫試劑盒洗板方法 

            手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

            自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

            操作步驟

            從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

            樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

            除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

            每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

            結(jié)果判斷

            大鼠Ⅳ型膠原Col Ⅳ酶聯(lián)免疫試劑盒 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),按曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。

             

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