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八種抗體知識課堂
閱讀：2892 發(fā)布時間：2021-7-281、流式抗體
流式抗體是經(jīng)過流式實驗驗證的，一般是針對單一種屬的直接帶熒光標(biāo)記的單克隆抗體，檢測的是單細(xì)胞懸液，結(jié)果通過流式細(xì)胞儀分析。
2、免疫熒光抗體
免疫熒光抗體是經(jīng)過免疫熒光實驗驗證的單克隆或者多克隆抗體，抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記，通過FITC、CY3等熒光標(biāo)記二抗顯色，結(jié)果通過熒光顯微鏡觀察。
3、免疫組化抗體
免疫組化抗體是經(jīng)過免疫組化實驗驗證的單克隆或者多克隆抗體，抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記，通過酶標(biāo)二抗催化底物顯色，結(jié)果通過普通光學(xué)顯微鏡觀察。
4、熒光標(biāo)記抗體
熒光標(biāo)記抗體一般指的是帶FITC、CY3等熒光標(biāo)記的二抗，用于免疫熒光實驗中識別對應(yīng)的一抗，或者FITC、CY3標(biāo)記的熒光一抗，可用于流式或免疫熒光實驗，只有經(jīng)過流式驗證的熒光抗體才能稱為流式抗體。
5、普通抗體
普通抗體一般指不帶標(biāo)記的單克隆或者多克隆抗體，反應(yīng)性和應(yīng)用一般較廣，能做多個種屬的多種實驗應(yīng)用，最后實驗結(jié)果的觀察需要依賴酶催化底物顯色或者發(fā)出熒光后檢測，或者FITC、CY3等熒光標(biāo)記的二抗發(fā)出熒光檢測。
6、封閉抗體
封閉抗體是流式實驗中用于特異性封閉細(xì)胞表面Fc受體的，不帶熒光標(biāo)記的純抗，如檢測小鼠的細(xì)胞樣本，封閉抗體為Purified Anti-Mouse CD16/32 Monoclonal Antibody。封閉抗體的作用是減少流式抗體染色過程中的非特異性染色，如果需檢測的是某些表面表達(dá)FC受體較豐富的細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞，染色前必須使用封閉抗體。
7、WB抗體
流式抗體是經(jīng)過流式實驗驗證的，一般是針對單一種屬的直接帶熒光標(biāo)記的單克隆抗體，檢測的是單細(xì)胞懸液，結(jié)果通過流式細(xì)胞儀分析。
WB抗體是經(jīng)過WB實驗驗證的單克隆或者多克隆抗體，抗體上面一般不帶標(biāo)記，通常情況下是通過HRP酶標(biāo)二抗催化底物ECL發(fā)出熒光，通過曝光后顯出條帶。
8、二抗
二抗一般不能直接識別到抗原，需要通過結(jié)合能識別目標(biāo)蛋白的一抗間接偶聯(lián)到目標(biāo)蛋白上。針對不同的實驗應(yīng)用類型，二抗上面可以選擇不同的標(biāo)記，如做WB和IHC實驗，通常情況下選擇帶HRP酶的二抗，做IF實驗，一般選擇帶FITC、CY3等熒光基團(tuán)的二抗，也有些二抗標(biāo)記biotin，biotin自身并不帶熒光集團(tuán)，也不能催化底物顯色或者發(fā)出熒光，因此選擇biotin標(biāo)記的二抗，還需要選擇HRP酶或者熒光標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)到生物素上，進(jìn)一步反應(yīng)才能檢測到目標(biāo)蛋白。