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ELISA 實驗基本原理與必要的試劑
閱讀：1299 發(fā)布時間：2021-11-3ELISA 即酶聯(lián)免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標記（偶聯(lián)）的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標儀測定待測物顏色與標準物顏色的差異，繪制出酶活曲線得出待測物濃度。
ELISA的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；
（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；
（3）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應，產生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。ELISA實驗中有三種必要的試劑：
1、 固相的抗原或抗體（用于結合到固相載體上）；
2、標記的抗原或抗體（標記物）；
3、作用的底物（顯色劑，用于顯色）。