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詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Betulin | 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg | 1～3天 |
商品介紹：
Betulin是一種SREBP抑制劑，在K562細胞中的IC50值是14.5μM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ CAS號：473-98-3 別名：Trochol 純度：98.0% 分子量：442.72 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
節(jié)桿菌Paenibacillus macerans
桃色枝頂孢Bacillus subtilis
鍺栓孔菌 Paenibacillus polymyxa
美味側耳(紫孢側耳)Paenibacillus polymyxa
斑玉蕈Paenibacillus macerans
鏈霉菌Paenibacillus macerans
草木樨中華根瘤菌Paenibacillus polymyxa
蠟樣芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa
掘氏疫霉*Paenibacillus polymyxa
黃曲霉Bacillus licheniformis
果生鏈核盤菌Paenibacillus polymyxa
泡盛曲霉Paenibacillus polymyxa
櫟生青霉Bacillus cereus
長柄鏈格孢Bacillus cereus
阿維菌鏈霉菌Bacillus cereus
鼠傷寒沙門氏菌Bacillus cereus
磷化指狀蛋白RET抗體草假單胞菌雪白彎頸霉
胰島單克抗體巴利阿里假單胞菌雪白曲霉
磷化雷帕霉靶蛋白復合體2抗體以色列色鹽桿菌彎孢霉屬菌種
磷化Runx3抗體鹽脫氮枝芽孢桿菌田無鏈霉菌
SREBP抑制劑(Betulin)L-酪叔丁酯
英文名稱：L-Tyrosine tert-butyl ester
其他英文名稱：Tert-Butyl L-tyrosinate；H-Tyr-OtBu
產(chǎn)品規(guī)格：特純，98%
包裝：5克/25克/100克
CAS號：16874-12-7
C13H19NO3=237.29
級別：Puriss
含量：≥99.0%
比旋光度：+25±1°（C= 2% in ethanol）
熔點：140～145℃
性狀：至類結晶粉末。
用途：生化研究。
保存：RT
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