化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
雞氣管黏膜上皮細(xì)胞永生化 | 1×106 | A01X1234 |
細(xì)胞詳述
氣管以軟骨、肌肉、結(jié)締組織和黏膜構(gòu)成。軟骨為"C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。在近端下呼吸道的上皮表面，主要是纖毛上皮細(xì)胞，它與基底細(xì)胞及杯狀細(xì)胞一起構(gòu)成假復(fù)層上皮，到達(dá)氣管腔表面的大部分細(xì)胞為纖毛上皮細(xì)胞，基底細(xì)胞與基底膜相連，通過半橋粒固定于上皮，在遠(yuǎn)端下呼吸道中，Clara細(xì)胞和基底細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)，纖毛細(xì)胞已不存在，杯狀細(xì)胞數(shù)量減少，上皮形態(tài)更象柱狀，整個(gè)上皮存在于一薄層基底膜上，通過間質(zhì)結(jié)締組織組成的網(wǎng)狀層相互支撐，上皮下存在其它的結(jié)締組織和纖維細(xì)胞。
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
注意事項(xiàng)： 收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常氣管黏膜組織。
2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人子宮頸上皮細(xì)胞 | NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
乳腺癌膜相關(guān)蛋白101抗體 | PE-Cy7標(biāo)記的胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 |
MUM2B人侵襲性脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
MUM2B人侵襲性脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的SEC14樣蛋白1抗體 |
MV-4-11人髓性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的磷化粘著斑激抗體 |
MV-4-11人髓性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK2抗體 |
NALM-6人前B急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體 |
NALM-6人前B急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體 |
NB 4急性早幼粒株細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的二甲基甘氨脫氫抗體 |
NB 4急性早幼粒株細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的腎細(xì)胞癌抗原NYREN 45抗體 |
NCCIT人畸胎癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的藍(lán)色熒光蛋白的工程變體蛋白單克隆抗體 |
NCCIT人畸胎癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 雞氣管黏膜上皮細(xì)胞永生化PE-Cy7標(biāo)記的磷化HER2受體抗體 |
NCI-H1299人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的磷化膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體 |
NCI-H1299人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的NXF2蛋白抗體 |
NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | PE-Cy7標(biāo)記的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 |
化工儀器網(wǎng)