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            上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>>BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

            BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

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            • BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-04-20 15:16:06瀏覽次數(shù):346

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
            貨號 FS-X9795 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
            BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒正在出售的產(chǎn)品:小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2澤瀉C-23-醋酯;澤瀉C單乙酯Human, Mouse
            小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9澤瀉F(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            人Ⅰ型膠原C端肽粘委陵菜(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            大鼠脂蛋白磷脂A2戰(zhàn)骨(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-3獐牙菜苷(標(biāo)準(zhǔn)品

            詳細(xì)介紹

            中文名稱:BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

            英文名稱:BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit

            產(chǎn)品規(guī)格:共100ml

            發(fā)貨周期:1~3天

            BCIP/NBT 堿性磷酸酯酶顯色試劑盒是一種用于免疫組化顯色、Western 等膜顯色和誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS 鑒定等的試劑盒。

            BCIP/NBT 是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP 會被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會和NBT 發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan。

            本試劑盒可以用于細(xì)胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS 的鑒定,也可以用于Western 等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。

            組份規(guī)格:

            試劑A:堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 100ml

            試劑B:BCIP 溶液(300X) 350μl

            試劑C:NBT 溶液(150X) 700μl

            使用說明

            1. 對于組織切片或細(xì)胞樣品或膜,在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5 分鐘。對于檢測內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5 分鐘。

            2. 按照如下比例依次加入各溶液,混勻后即配制成BCIP/NBT 染色工作液,配方如下:試劑A:堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 3mL試劑B:BCIP 溶液(300X) 10μL試劑C:NBT 溶液(150X) 20μL染色工作液總體積:3.03mL

            3. 后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入適量BCIP/NBT 染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。

            4. 室溫避光孵育5-30 分鐘或更長時間(可長達(dá)24 小時),直至顯色至預(yù)期深淺。

            5. 去除BCIP/NBT 染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2 次即可終止顯色反應(yīng)。

            6. 對于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色,以便于觀察。對于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。

            儲存:4℃,有效期一年。

            注意事項:

            1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

            2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

            3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

            4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

            5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

            6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

            7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

            8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

            9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

            10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

            11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

            制霉菌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium chloride鐵螯合抗體包裝1g

            制霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Guanidine hydrochlorideDH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體包裝1g

            重長春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adonitol磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝5g

            重腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Yeast extract上皮粘附分子抗體包裝1g

            周效磺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RNase A Solution酪蛋白激受體B2抗體包裝5g

            注射用益氣復(fù)脈隨行對照品(暫行)英文名稱: D-Glucose, monohydrate表皮生長因子抗體包裝1g

            壯觀霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SDS表皮生長因子受體3抗體包裝5g

            子囊霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 6000酪蛋白激A4受體抗體包裝1g

            (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tween 20上皮鈣粘附分子抗體包裝5g

            左卡尼汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triton X-100紅生成受體抗體包裝1g

            左羥哌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tryptone腦啡肽抗體包裝5g

            左旋地平/磺左旋地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-BiotinEID2蛋白抗體包裝25ml

            左旋奧沙利鉑(奧沙利鉑雜質(zhì)D)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glycerol上皮粘附分子抗體包裝500ml

            左旋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium citrate, trisodium salt, dehydrate紅膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體包裝100g

            左氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gelatin腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體包裝500g

            竹瘤座菌Balansia│take (Miyake) Hara 質(zhì)量規(guī)格:含量98.0-102%,I型糖蛋白130試劑盒三七總皂苷;Panax notogins

            纖細(xì)白僵菌Beauveria│brongniartii (Sacc.) Petch 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP32羰基還原[NADPH] 1試劑盒SN-38;7-Ethyl-10-Hyd

            禽分枝桿菌Mycobacterium│avium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品碳酐9試劑盒楊苷;Salicoside
            BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒小麥胚芽粉

            英文名稱: Wheat gern powder

            產(chǎn)品規(guī)格: BR

            包裝:500克

            CAS號:68917-73-7

            級別:BR

            粗蛋白含量(干基):≥30%

            脂肪含量:≤1.5%

            水分:≤12%

            性狀:淺黃色粉末。

            用途:生化研究。

            保存:RT

            操作規(guī)程:

            1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

            2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。

            3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

            4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

            5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

            6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

            7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

            8、結(jié)果分析

            a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00

            b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

             


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