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            細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(乳酸脫氫酶法)

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            • 細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(乳酸脫氫酶法)

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            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-04-15 16:47:24瀏覽次數(shù):319

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次
            貨號(hào) FS-X9528 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
            細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(乳酸脫氫酶法)公司*的商品:神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體自然銅(醋煅)(標(biāo)準(zhǔn)品) Apraclonidine hydrochloride
            胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體棕櫚(標(biāo)準(zhǔn)品) Tazarotene
            神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體棕矢車(chē)菊素(標(biāo)準(zhǔn)品) Tazarotene
            神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體走馬胎(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderic acid D
            膜相關(guān)蛋

            詳細(xì)介紹

            培養(yǎng)操作步驟:

            1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

            2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

            3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

            4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

            5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

            產(chǎn)品屬于:

            中文名稱(chēng)

            英文名稱(chēng)

            產(chǎn)品規(guī)格

            發(fā)貨周期

            細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(乳酸脫氫酶法)

            LDH Cytotoxicity Assay Kit

            100次|500次

            1~3天

            商品介紹:

            本試劑盒也稱(chēng)乳酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒(LDH Assay Kit)或乳酸脫氫酶釋放檢測(cè)試劑盒(LDH Release Assay Kit),是一種基于diaphorase催化的INT顯色反應(yīng),通過(guò)比色法檢測(cè)細(xì)胞毒性時(shí)釋放的乳酸脫氫酶活性或檢測(cè)其它樣品中的乳酸脫氫酶活性的試劑盒。

            本試劑盒可以用于常規(guī)的乳酸脫氫酶活性的檢測(cè),更常用于以LDH釋放為指標(biāo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)。同時(shí),基于細(xì)胞總?cè)樗崦摎涿富钚缘臋z測(cè),本試劑盒也可以用于檢測(cè)細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)。

            細(xì)胞凋亡或壞死而造成的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的破壞會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漿內(nèi)的酶釋放到培養(yǎng)液里,其中包括酶活性較為穩(wěn)定的乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)。通過(guò)檢測(cè)從質(zhì)膜破裂的細(xì)胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性,就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞毒性的定量分析。LDH釋放被看做細(xì)胞膜完整性的重要指標(biāo),并被廣泛用于細(xì)胞毒性檢測(cè)。LDH釋放被認(rèn)為是以前使用放射性的51Cr標(biāo)記細(xì)胞,隨后通過(guò)51Cr釋放進(jìn)行細(xì)胞膜完整性檢測(cè)的安全有效的替代方法。

            本試劑盒的基本原理是,在乳酸脫氫酶的作用下,NAD+被還原生成NADH,NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脫氫酶(diaphorase)催化反應(yīng)生成NAD+和強(qiáng)生色物甲臜(formazan),在490nm波長(zhǎng)下產(chǎn)生吸收峰,從而可以通過(guò)比色來(lái)定量乳酸脫氫酶的活性。吸光度與乳酸脫氫酶活性成線性正相關(guān)。該酶聯(lián)反應(yīng)原理的示意圖如下:

            試劑盒組份(100次為例):

            LDH釋放試劑——————1.5ml

            乳酸溶液———————2ml

            酶溶液————————1ml×2

            INT溶液(10X)—————0.2ml

            INT稀釋液——————2ml

            儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年
            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

            2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

            5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒英文名稱(chēng):HBeAg ELISA KitADCK1蛋白抗體包裝25g

            乙型肝炎e抗體(HBeAb)elisa試劑盒英文名稱(chēng):HBeAb ELISA Kit?;o結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝5g

            乙酰A(acetyl-CoA)elisa試劑盒英文名稱(chēng):acetyl-CoA ELISA Kitα/β解酶4抗體包裝1g

            乙酰膽轉(zhuǎn)移酶(CHAT)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CHAT ELISA KitADCK2蛋白抗體包裝250mg

            乙酰酯酶(AchE)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AchE ELISA Kit乙脫氫酶16家庭A1抗體包裝1g

            乙酰受體抗體(AChRab)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AChRab ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝1g

            乙酰膽(ACH)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ACH ELISA Kit乙脫氫酶1抗體包裝250mg

            胰脂肪酶(PL)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PL ELISA Kitδ氨基乙酰酸脫酶抗體包裝1g

            原酶(PK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PK ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體包裝500mg

            胰高血糖素樣肽2(GLP-2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):GLP-2 ELISA Kitα2巨球蛋白(α-2M)抗體包裝250mg

            胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):GLP-1 ELISA KitACCSL蛋白抗體包裝500mg

            胰高血糖素(GC)elisa試劑盒英文名稱(chēng):GC ELISA Kit胎蛋白抗體包裝100mg

            胰淀素(Amylin)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Amylin ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體包裝25g

            胰島細(xì)胞抗體(ICA)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ICA ELISA Kit星形肌動(dòng)蛋白抗體包裝1g

            胰島素自身抗體(IAA)elisa試劑盒英文名稱(chēng):IAA ELISA Kit系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體包裝5g

            激活素受體2A抗體胱天蛋白酶14(CASP14)Selumetinib (AZD6244) is a potent, highly selective MEK1 inhibitor with IC50 of
            細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(乳酸脫氫酶法)棕櫚酸異丙酯

            其他 十六酸-1-甲基乙基酯;十六酸異丙酯;十六烷酸異丙酯

            英文名稱(chēng): Isopropyl palmitate

            其他英文名稱(chēng): Isopropyl hexadecanoate

            產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%

            包  裝: 100毫升/500毫升

            CAS號(hào):142-91-6

            C19H38O2=298.51

            級(jí)別:AR

            含量:≥98.0%

            折光率:1.437~1.439

            比重:0.852~0.857

            性狀:無(wú)色透明油狀液體。無(wú)臭。溶于乙醇、礦物油和固定油,不溶于水。相對(duì)密度(d2020)0.850~0.869。熔點(diǎn)8~15℃。沸點(diǎn)160℃(0.22kPA)。折光率(n20D)1.437~1.440

            用途:生化研究?;瘖y品。制備外用藥劑的油性原料

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