化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2077 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 種屬來(lái)源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
兔腸粘膜上皮細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) | 兔腸粘膜上皮細(xì)胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號(hào) | A01X2077 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人肝癌組織源細(xì)胞 | BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 |
骨/軟骨蛋白多糖1重組兔單克隆抗體 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 |
A7r5大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員21A抗體 |
A875人黑色瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的絲氨/精氨相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體 |
AAV-293人胚腎細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的泛特異性蛋白OTB1抗體 |
ACHN人腎腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的泛結(jié)合E2F抗體 |
AGS人胃腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的原癌基因AF4蛋白抗體 |
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的血小板生成受體抗體 |
AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的FAM57B蛋白抗體 |
ARPE-19人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5抗體 |
AsPC-1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的鋅指蛋白185抗體 |
AsPC-1/GEM人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌吉西他濱耐藥株細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 兔腸粘膜上皮細(xì)胞羅丹明（RBITC）標(biāo)記的乳腺癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體 |
B16-F10小鼠黑色瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的β淀粉樣肽（25-35）抗體 |
B16小鼠黑色瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的卵透明帶糖蛋白2抗體 |
BV2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 羅丹明（RBITC）標(biāo)記的轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白/前白蛋白單克隆抗體 |
化工儀器網(wǎng)